GB/T 36194-2018金鱼造血器官坏死病毒检测方法.pdf

ICS 65.020.30 B 41 £3© 中华人民共和国国家标准 GB/T 36194—2018 金鱼造血器官坏死病毒检测方法 Detection method of goldfish haematopoietic necrosis virus 2018-05-14 发布 2018-12-01 实施 发布 GB/T 36194—2018 ■ 1 / . — 刖 s 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出。 本标准由全国水产标准化技术委员会(SAC/TC 156)归口。 本标准起草单位:全国水产技术推广总站 、中国检验检疫科学研究院、北京出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:李清 、王娜、谷强、张旻、景宏丽、吴绍强、张利峰、江育林、陈浩楠。 I GB/T 36194—2018 金鱼造血器官坏死病毒检测方法 1范围 本标准规定了金鱼造血器官坏死病毒(鲤疱疹病毒2型)的PCR检测、荧光PCR检测和综合判定 方法。 本标准适用于金鱼造血器官坏死病毒的鉴定，用于金鱼造血器官坏死病毒引起的相关疾病的流行 病学调查、诊断、检疫和监测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件 ，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 18088出入境动物检疫采样 SC/T 7103水生动物产地检疫采样技术规范 3缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CyHV :鲤疱疹病毒(cyprini herpesvirus) CyH V-2 :鲤疱疹病毒 2 型(cyprini herpesvirus 2) GFHNV :金鱼造血器官坏死病毒(goldfish haematopoietic necrosis virus) dNTP :脱氧核糖核昔三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate) bp：碱基对(base pair) Ct：循环阈值(cycle threshold) CT AB：十六烷基三甲基漠化鞍(cetyltrimethylammonium bromide) EDTA :乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid) Tris :三(疑甲基)氨基甲烷[tris (hydroxymethyl) aminomethane] 4试剂和材料 除非另有说明，仅使用分析纯试剂。 4.1水:应符合GB/T 6682中一级水的规格。 4.2 Tag DNA聚合酶：5 U/MLO -20 °C保存，避免反复冻融或温度剧烈变化。 4.3 dNTP：含 dCTP 、dGTP、dATP 、dTTP 各 10 mmoL/L,-20 °C保存。 4.4引物：浓度为10 “moL/L,—20 °C保存。 a) CyHV引物 1) CyHVpol-F： 5/-CCCAGCAACATGTGCGACGG-3, 2)