种子活力的快速测定.pptVIP

种子活力的测定 实验目的： 掌握几种种子活力快速测定方法。 Ⅰ氯三苯基四氮唑法（TTC法） 实验原理 凡命力的种子胚都有旺盛的代谢，许多生理活动过程中会有氧化还原作用，能产生含氢的还原性物质如NADH2 或NADPH2 ，这些物质可以还原渗入细胞中的TTC，使无色的TTC变为红色的三苯基甲囋（TTF）。 器材与试剂 仪器：恒温箱、烧杯、培养皿、镊子、刀片、天平。 试剂：0.5%的TTC溶液（0.5gTTC溶于少于95%乙醇后用蒸馏水稀释到100ml避光备用）。 材料：小麦种子 试验步骤 1、浸种：将待测小麦种子在30-35度浸种过夜以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。 2、显色：取吸胀的种子100粒，用刀片沿种子胚中心线纵切两半，取其中一半放在培养皿，加入0.5%TTC盖住种子，30度恒温箱中培养30分钟，观察胚及胚乳着色情况。凡着红色的种胚为活种子。 3、计算活种子的百分率。 Ⅱ溴麝香草酚蓝法（BTB法） 实验原理： 凡活种子都有呼吸作用，吸收空气中的O2，放出CO2。后者溶于水后成为碳酸，然后分解出H+和HCO3-，使种胚周围环境酸化，可用溴麝香草酚蓝法来测定酸度的变化。 器材与试剂 仪器：恒温箱，天平，培养皿，烧杯，镊子，漏斗，滤纸和琼脂。 试验步骤： 1、浸种：同TTC法 2、显色：取吸胀的种子100粒，整齐的埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中，种子胚向下相互远离，将培养皿置于30—35度恒温箱中1h后，在蓝色背景下观察，胚周围有黄色晕圈为活种子，没有则为死种子。 3、用沸水杀死的种子做同样处理，对比观察。 4、计算活种子率。 Ⅲ 红墨水染色法 实验原理 凡活种子的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，死种子则没有此能力，染料就可进入死细胞内部而染色。 器材及试剂 恒温箱，烧杯，培养皿，漏斗，镊子，5%红墨水，萌发的小麦种子。 实验步骤 1、浸种：同上。 2、染色：取吸胀的小麦种子100粒，沿胚中线切开为两半，一半置于培养皿中，加入5%红墨水没过种子，染色10—15分钟后，倒掉红墨水，用水冲洗多次至冲洗无红色。检查胚和胚乳着色情况。 用沸水杀死的另一半种子作对照试验，与为杀死的种子比较 胚及胚乳着色情况。 3、计算活种子率。 作业 比较三种方法的优缺点。