GB/T 34736-2017绵羊肺腺瘤病毒核酸斑点杂交检测技术.pdf

ICS 11.220 B 41 £3© 中华人民共和国国家标准 GB/T 34736—2017 绵羊肺腺瘤病毒核酸斑点杂交检测技术 Detection of jaagsiekte sheep retrovirus with dot blotting hybridization 2017-11-01 发布 2018-05-01 实施 发布 GB/T 34736—2017 ■ r ■ —— 弓 本标准按照GB T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC 181)归口。 本标准主要起草单位：内蒙古农业大学、中华人民共和国内蒙古出入境检验检疫局、北京农业职业 学院。 本标准起草人:刘淑英、齐景伟、王海艳、王振玲、马学恩、梁化春、赵泽赞、孙晓林。 T GB/T 34736—2017 引 言 绵羊肺腺瘤病(ovine pulmonary adenomatosis, OPA)是由绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep ret­ rovirus, JSRV)引起的一种慢性、进行性、接触传染性的肺脏肿瘤性疾病 。主要特征是患羊咳嗽、呼吸 困难、大量浆液性鼻液、消瘦、II型肺泡上皮细胞和无纤毛细支气管上皮细胞肿瘤性增生⑴ 。剖检可见 病羊肺脏发生实变，回缩不良，体积变大，比正常肺脏大2〜3倍 。肺表面有坚实的圆形粟粒大小的灰白 色结节即腺瘤灶，小结节发生融合，形成形状不一并且不规则的大结节 。气道内充满泡沫状液体，抬起 两条后腿可从鼻孔流出泡沫状液体即具有证病意义的小推车试验囚。 绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)是引起绵羊肺腺瘤病的病原 。在所有已研究过的正常绵羊基因组内都含 有约20拷贝的与JSRV密切相关的内源性逆转录病毒(endogenous retrovirus,ERVs)序列 ，因其基因 结构与绵羊肺腺瘤病毒的极为相似，也称为内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV),为了区别称绵羊肺腺瘤 病毒为exJSRV⑶ 。研究表明,enJSRV和exJSRV的基因结构在gag基因、长末端重复序列(LTR)、 env基因处区别较大,特别是env基因编码跨膜蛋白区域(TM)和长末端重复序列的U3区是2个高可 变区 。所以在检测病原exJSRV时，在这2个高可变区处设计特异性引物和制备特异性探针来排除 enJSRVM[5]。 到目前为止，全世界都没有建立统一特异性诊断该病的方法刀 。其原因有三个方面:一是该病的潜 伏期较长，病程较长，对处于潜伏期或临床症状不明显的病羊很难发现 。二是病羊体内检测不到循环抗 体，很难用常规的免疫学方法进行诊断，三是引起该病的病原绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)仍未建立体外培 养体系，所以常规的病毒分离鉴定方法也无法利用 。目前对该病的诊断还主要依靠临床症状和病理组 织学检查 。所以建立特异性诊断该病的技术标准将在国家岀入境检验检疫 、国内种羊安全评价、羊场检 疫清群等方面具有非常重要的意义。 n GB/T 34736—2017 绵羊肺腺瘤病毒核酸斑点杂交检测技术 1范围