实验2-分离以尿素为氮源的微生物.pptxVIP

第一章 微生物的利用;课题背景：尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨气以后，才能被植物利用。而土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。;什么是尿素和脲酶？;如何筛选分解尿素的细菌？;;例题：下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（ ）A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、水 D. KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水;实验设备及用品;从土壤中采集微生物;稀释涂布分离法;Step1：培养基的配制和灭菌;;Step3：制备细菌悬液;怎样梯度稀释菌液？;平行重复;每一个稀释度的菌液：接种到3个培养皿中。;Step4：用涂布分离法分离细菌;取10-3、10-4和10-5的土壤稀释液各0.1 mL，分别加到有LB培养基和尿素培养基的培养皿中。;;恒温培养箱;实验结果：全营养培养基中有较多的菌落，而尿素培养基中只有少量的菌落。;Step7：统计菌落数目;例题：用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中．得到以下几种统计结果，正确的是（ ） A. 涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B. 涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C. 涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D. 涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233;例题：稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是（ ） ①土壤取样 ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，制备土壤提取液 ③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布 ④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107的稀释度 A．①②③④ B．①③②④ C．①②④③ D．①④②③;思考与练习;例题：（2012·浙江高考）幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 请回答： （1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有　　　　，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现　　　　色环带。 （2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是　　　　灭菌。 A.高压蒸汽　　　　　　　　 B.紫外灯照射 C.70%酒精浸泡　　　　　 D.过滤;（3）步骤X表示　　　　　。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液　　　　到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得　　　　　菌落。 （4）在培养时，需将培养皿倒置并放在　　　　　中。若不倒置培养，将导致　　　　　。 （5）临床上用14C呼气实验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的　　　　　分解为NH3和14CO2。;倒平板;;例题：（2011·新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以　　　　　 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于　　　　　培养基。 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即　　　　　和　　　　　。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力　　　　　　。 （4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　　　　和　　　　　　。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。;