病原性球菌及杆菌.ppt

病原性球菌与肠道杆菌 一、实验目的 1.掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。 2.熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。 3.了解三种葡萄球菌产生的色素。 4.了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性。 5.了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SS平板上菌落特点。 二、实验内容 1.示教观察葡萄球菌、链球菌的形态 2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵 3.化脓性球菌的鉴定 ⑴三种葡萄球菌的色素观察 ⑵甲、乙型链球菌的溶血现象观察 4.甘露醇发酵实验 5.血浆凝固酶实验 乙型溶血性链球菌 溶血环 甘露醇发酵试验（示教） 分别取金葡、白葡菌落接种 到甘露醇发酵培养基 中，置 37℃培养箱， 培养24h。金黄色葡 萄球菌应能发酵甘露 醇产酸。 * * 1. 葡萄球菌、链球菌的培养物 示教 普通琼脂平板 血平板 菌落形状 色素 溶血性 金葡 圆形凸起光滑中等大小 金黄色 + 柠葡 同上 柠檬色 - 白葡 同上 白色 - 表1 葡萄球菌分类 按照色素不同 金黄色葡萄球菌 （金黄色） 表皮葡萄球菌 （白色） 腐生葡萄球菌 （柠檬色） 三种葡萄球菌的主要性状 性状 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 菌落色素 金黄色 白色 白色或柠檬色 血浆凝固酶 + - - 甘露醇 + - - 溶血性 β溶血 - - SPA + - - 耐热核酸酶 + - - 致病性 强 弱 无 血平板 甲型链球菌 针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环 (α溶血即不完全溶血） 乙型链球菌 针尖小菌落、透明宽大溶血环 （β溶血即完全溶血） 巧克力血平板 脑膜炎双球菌 菌落透明似露滴状 表2 表3 草绿色链球菌 不溶血链球菌 溶血性链球菌 多为条件致病菌 致病力强 无致病性 α溶血 (狭窄草绿色溶血环 ) β溶血 （宽大透明溶血环） 大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。 伤寒杆菌在SS培养基上形成相对较小，半透明，无色或淡黄色的菌落，产生硫化氢的细菌菌落中心呈黑色。痢疾杆菌在SS培养基上形成的菌落与伤寒杆菌菌落相似。 SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长；还含有乳糖和中性红，一般肠道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，产生碱性物质，故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖，产酸使指示剂变红，故菌落呈红色。 大肠杆菌 痢疾杆菌 双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁。指示剂为酚红。葡萄糖与乳糖的比例为1:10。　 若细菌分葡萄糖、乳糖产酸产气，使斜面与底层均呈黄色，且有气泡。（大肠杆菌) 若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底层pH降低；而上层少量酸因接触空气而氧化，并因细菌生长繁殖利用含氮物质生成碱性化合物，呈红色。 （伤寒杆菌、痢疾杆菌） 若细菌产生硫化氢时与培养基中硫酸亚铁作用,形成黑色的硫化铁呈黑色。（伤寒杆菌） 配合半固体培养基可观察肠道杆菌中的细菌动力。 Salmonella -Shigella Mediun 主要成分 基础营养 乳糖 指示剂 抑制剂 分解乳糖 不分解乳糖 产酸 PH 指示剂变红色 红色大菌落 大肠杆菌等 无明显变化 无色半透明小菌落 志贺菌等