定量分析方法特点（一）容量分析法的特点容量分析课件.pptVIP

3.仪器校正和检定 4.对溶剂的要求 测定供试品之前，应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求。5.测定法 测定时，须作波长校正。并作空白吸收。 用于含量测定的方法一般有以下几种： （1）对照品比较法：按各品种项下的方法，分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长测定供试品溶液和对照品溶液的吸收度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度： 式中Cx为供试品溶液的浓度,Ax为供试品溶液的吸收度，Cr为对照品溶液的浓度,Ar为对照品溶液的吸收度，D为稀释倍数，W为供试品取样量。 （2）吸收系数法：按各品种项下的方法配制供试品溶液，在规定的波长处测定其吸收度，再以该品种在规定条件下的吸收系数计算含量。含量％= 用本法测定时，应注意仪器的校正和检定。 （3）计算分光光度法： 当吸收度处在吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时，影响精度的因素较多，故对照品和供试品测试条件应尽可能一致。 若测定时不用对照品，如维生素A测定法，则应在测定时对仪器作仔细地校正和检定。 （二）荧光分析法1. 某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长更长的荧光。当激发光停止照射后，荧光随之消失。 同一种分子结构的物质，用同一波长的激发光照射，可以发射相同波长的荧光。 当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其荧光强度（也叫发射光强度）与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。 本法特点为： （1）灵敏度高，荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法为高，其灵敏度可达10-10g/ml一10-12g/ml（2）荧光分析法应在低浓度溶液中进行（3）空白试验 （4）对易被光分解的样品，为使仪器灵敏度定标准确避免因激发光多次照射而影响荧光强度，可选择一种激发光和发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的溶液，作为基准溶液。 在测定供试品溶液时用基准溶液代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。（5）荧光衍生化试剂（6）取样少，方法快速 2.含量测定  在每次测定前，用一定浓度的对照品溶液校正仪器的灵敏度；然后在相同条件下，读取对照品溶液及其试剂空白的荧光读数与供试品溶液及其试剂空白的荧光读数，用下式计算供试品浓度： 应在0.50-2.0之间 （三）色谱分析法 根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。 根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。 色谱分析法具有高灵敏度（可达10-12g/ml一10-15g/ml）、高选择性、高效能、高速度及应用广泛等特点。 （1）高效液相色谱法 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1.仪器为高效液相色谱仪。 色谱柱的填充剂和流动相的组分应按各品种项下规定。常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用。 Ch. P(2000)中，常以甲醇一水，或加有乙睛、缓冲液、反离子物质等为流动相。  注样量一般为数微升。柱温一般为室温，检测器为紫外吸收检测器。 正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意改变外、其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相、各组分的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体品种并达到系统适用性试验的要求。一般色谱图20分钟内记录完毕。 2.系统适用性试验 按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，两种方法：2.1 用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；2.2 规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。 （1）色谱柱的理论板数（n）：在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间tR和半峰高宽（Wh/2）按  n=5.54（tR/Wh/2 ）2计算色谱柱的理论板数。如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体性能、色谱柱充填的优劣等），使理论板数达到要求。 （2）分离度：定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度，分离度（R）的计算公式为