扇贝多肽对机体免疫功能的影响及其作用机制的实验研究-病理生理学专业论文.docxVIP

扇贝多肽对机体免疫功能的影响及其机制的实验研究 扇贝多肽对机体免疫功能的影响及其机制 的实验研究 硕士研究生： 张彩梅 导 师： 刘晓萍教授 崔瑞耀教授 摘 要 免疫是机体对病原微生物侵袭的防卫功能及维持内环境稳定的功 能．许多疾病的发生、发展与机体的免疫功能低下或免疫缺陷有着密切 的关系，为此从调节患者免疫功能入手，以治疗疾病受到广泛重视。因此， 免疫药物的开发成为医药工作者研究的重点。由于海洋中蕴藏着丰富的 生物活性物质资源，从海洋生物及其代谢产物中开发出具有特异、新颖 和高效的免疫药物，成为免疫药理学研究的新领域， 扇贝多肽(PCF)是从栉孔扇贝中提取的小分子水溶性多肽，初步研 究证明PCF可减轻紫外线和”co辐射对胸腺细胞和脾细胞的氧化损伤， 并能减弱雌二醇对淋巴细胞增殖的抑制作用。提示PCF对淋巴细胞具有 一定的保护作用。有关PCF的其它免疫功能研究，尚未见报道。 本实验进一步探讨PCF在离体和整体条件下对细胞免疫和非特异性 免疫的影响及其作用机制。我们应用地塞米松(DEX、建立免疫抑制模型． 通过胸腺指数和脾脏指数及H．E染色来观察PCF对小鼠免疫器官形态学 的影响；采用MTT比色法研究PCF在体内外对ConA诱导的淋巴细胞转化 能力的影响；通过流式细胞仪分析PCF在体内外对小鼠胸腺细胞亚群和 脾脏(整体为外周血)T淋巴细胞亚群的影响；采用LDH释放法和吞噬 中性红法(整体为吞噬鸡红细胞法)分别研究PCF在体内外对NK细胞杀 伤活性和单核巨噬细胞吞噬功能的影响；应用免疫细胞化学染色法观察 PCF在体外对单核巨噬细胞Bel-2表达的影响。实验结果表明：①PCF对 正常小鼠和DEX处理小鼠胸腺指数和脾脏指数都有轻微升高，但与对照 组比较均无统计学差异(P0．05；PO．05)。H．E染色显示，PCF能够明 显改善DEX所致的小鼠脾脏白髓萎缩，使其同正常大小，但对DEX所致 胸腺退化几乎无任何改变。②PCF在体内外均可促进ConA诱导的淋巴 细胞转化fPO．05；P0．01)，并减弱DEX对淋巴细胞转化的抑制作用 (Po．0l：P0．01)③与正常对照组比较，PCF体外孵育可使小鼠胸腺 (Po．0l：P0．01)③与正常对照组比较，PCF体外孵育可使小鼠胸腺 L。T一一Lyt一2一(DN)细胞和LYt一2+细胞百分比明显降低fPO 05：P0．051， 脾脏L。T；+细胞百分比显著增高(P0．01)，Lyt-2+细胞百分比降低 (PO．05)，L。T4*／Lyt一2+比值升高(P0．01)；PCF在整体条件下对小鼠 胸腺细胞和正常小鼠外周血T淋巴细胞各亚群的百分比无明显影响，但 使DEX处理小鼠外周血L。T。+细胞百分比和Ly卜2+细胞百分比均提高 fPO．05；PO．05)。④PCF在体内外均可增强脾脏NK细胞杀伤活性 (P0．05；PO．01)，并减弱DEX对NK细胞杀伤活性的抑制作用(Po．0l； P0．01)。⑤PCF在体外可增强大鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和Bcl一2表达 (PO．01；PO．05)，并拮抗DEX对巨噬细胞Bcl．2表达的抑制作用 (P0．05)；PCF在整体条件下可减弱DEx对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功髓 的抑制作用(PO．01)。提示，PCF在体内外对免疫功能均具有一定的正 向调节作用，其在整体条件下可能主要是通过影响小鼠外周成熟的免疫 细胞而发挥作用。 关键词： 扇贝多肽 地塞米松 L。T。+／Lyt一2+ 胸腺／脾脏 淋巴细胞 NK细胞 巨噬细胞 Bcl·2 An An Experimental Study of the Effects and Mechanism of Polypeptides from Chlamys Farrie(PCF)on the Immunity ABSTRACT Immunity is the ability of body to defense against pathogenic invaders and to guard against the uncontrolled growth of cells into neoplasms or tnmours，maintaining the homeostasis of body．The genesis and development of lots of diseases are associated with the disturbance of immune system or dysfunction of immunity,hence it is taken seriously starting with modulating the immunol function tO treat