利用重组人源胶原蛋白制备生物医学组织工程材料-生物化工专业毕业论文.docxVIP

硕士学位论文利用重组人源胶原蛋白制备生物医学 硕士学位论文 利用重组人源胶原蛋白制备生物医学 组织工程材料 作 者： 周爱梅 指导教师： 杨树林教授 南京理工大学 2015年3月 Master Master Degree Dissertation Fabrication of Recombin ant Human．source C ollagen Scafl’0lds for Biomedical Tissue Engineering 爿砌“Z乃D跖以Z胁优么忍口跖 Stlpen琏sed by P，pf Shntin lang Nanj ing UniVersity of ScienceTechnology March，2015 声 声 明 本学位论文是我在导师的指导下取得的研究成果，尽我所知，在本学 位论文中，除了加以标注和致谢的部分外，不包含其他人已经发表或公布 过的研究成果，也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的 材料。与我一同工作的同事对本学位论文做出的贡献均己在论文中作了明 确的说明。 研究生签名： 学位论文使用授权声明 南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可以借阅或上 网公布本学位论文的部分或全部内容，可以向有关部门或机构送交并授权 其保存、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容。对于必威体育官网网址论文， 按必威体育官网网址的有关规定和程序处理。 研究生签名： 硕士学位论文 硕士学位论文 利用重组入源胶原蛋白制备生物医学组织工程材料 摘 要 本论文以基因工程菌A幽砌p口s胁加高密度发酵获得的重组人源胶原蛋白 (Reconlbillant Humall-source CollageIl，ImSC)为主要研究对象，对其进行分离纯化和 结构表征，并与壳聚糖复合，通过冷冻干燥技术制备三维多孔状海绵支架。选择具有强 抗氧化活性的原花青素(Proanthocyallidins，PA)作为交联剂，以期提高支架的各方面 特性。 1．通过分离纯化获得的RHSC达到电泳纯，测试显示：纯度99％，回收率93％。 采用Dsc，紫外光谱，红外光谱和NMR对RHSC进行结构表征，并与标准IⅡ型胶原蛋 白比对，确定RHsc具有III型胶原蛋白的特征结构。 2．通过改变壳聚糖．重组人源胶原蛋白海绵基质制备过程中的因素发现，醋酸的浓 度和壳聚糖与RHsc的质量比是影响微观结构形成的关键因素。通过PA交联作用制备 的海绵成品具有良好的理化性质，其内部孔径约为110一160um，孔隙率92％，吸水率约 为3900％；红外光谱测试发现，PA与海绵基质可以形成稳定的氢键；DSC和TG分析 显示：通过交联作用，海绵的热稳定性提高；体外酶解实验表明，交联后海绵的抗酶解 能力增强。对海绵进行生物相容性研究，内容包括细胞的黏附、迁移、增殖和细胞形态 等方面，结果显示：海绵支架具有较好的细胞相容性。 PA交联的壳聚糖一重组人源胶原蛋白海绵是一种理化性质良好的生物材料，对细胞 的黏附、生长和增殖都有一定的促进作用，尽管目前还处于实验研究阶段，但有望进一 步应用于组织工程化器官的研究以及临床的应用。 关键词：重组人源胶原蛋白，壳聚糖，原花青素，组织工程，生物相容性 Abstract Abstract 硕士学位论文 Abstract RecombinaIlt human—source CollageIl(RHSC)was choosen as the main object obtained tllrou曲hi曲-density fbnnentalion of genetic en百neering bacteria Pf幽缸p邪幻，fs．Firstly， s印arated a11d p嘶fied RHSC龀Im suspeIlsion and charact嘶zed its sructuI．e．Then，combined it with c11itosall to prepare three-dimensional porous sponges using f诧eze-dr姐ng tecllniques． The strong antioxidallt of proalltllocyanidins(PA)was selected as cross一1in