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海洋酵母菌发酵产铁载体的研究
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本 科 毕 业 论 文
海洋酵母菌发酵产铁载体的研究
学生姓名 学号
指导教师 教授
院、系、中心 海洋生命学院
专业年级 2008级生命基地班
论文答辩日期2012年 6 月 8 日
中 国 海 洋 大 学
海洋酵母菌发酵产铁载体的研究
摘要
铁载体在人类疾病的治疗、鱼病的控制及环境修复等方面有着巨大的应用前景。本次实验使用已知的高产铁载体的海洋普鲁兰类酵母HN6.2及其改造菌株菌株。将这两个菌株采用一系列不同的常用培养基进行培养,测量其在不同培养基中铁载体的产量。然后选取铁载体产量最高的培养基在2L发酵罐中进行扩大化培养。通过间隔连续取样,对菌株的生长情况、还原糖含量和铁载体产量进行检测,从而获得最佳的培养时间,从而为以后的实验提供参考。最终得到的最佳培养基为加入了鸟苷酸的产铁载体培养基,最佳的培养时间为108h,铁载体产量可达0.511g/L.
关键词:普鲁兰酵母、铁载体、培养基、扩大化培养、培养时间
The studies on siderophore production by the marine yeast
Abstract
Siderophore has a great prospect for the treatment of human disease, fish disease control and environmental restoration. High-yield siderophore strain Aureobasidium pullulans HN6.2 and Its strain of gene knock-out are used in this experiment . These two strains are cultured with a range of different commonly used culture media. Measuring the production of siderophore in these media, then select the medium whose production of Siderophore is the highest for enlarge culture in a 2L fermenter. By sampling every 12 hours, the growth of the strains, reducing sugar content and siderophore production were detected,Then the best culture time can be got which can provide a reference for further experiments.
Keywords: Aureobasidium pullulans HN6.2, siderophore, medium, enlarge culture, Incubation time
目录
TOC \o 1-3 \h \z \u 1前言 h 1
1.1铁载体的定义 h 1
1.3真菌铁载体的生物合成 h 3
1.4铁载体的检测 h 5
1.4.1化学法 h 5
1.4.2生物法 h 6
1.5铁载体的应用 h 7
2不同培养基中海洋普鲁兰类酵母(Aureobasidium pullulans)HN6.2的铁载体产量 h 7
2.1实验材料与试剂 h 8
2.1.1菌种 h 8
2.1.2试剂 h 8
2.1.3培养基 h 8
2.2培养条件 h 8
2.2.1平板培养 h 8
2.2.2液体培养 h 8
2.3铁载体浓度测量(Csaky试验法) h 9
2.4实验过程 h 9
2.5实验结果与讨论 h 9
3菌株的扩大化培养 h 13
3.1 实验材料与试剂 h 13
3.1.1 菌株 h 13
3.1.2试剂 h 13
3.1.3培养基 h 14
3.2培养条件 h 14
3.2.1平板培养 h 14
3.2.2液体培养 h 14
3.3铁载体浓度测量(Csaky试验法) h 14
3.4蛋白浓度测量(考马斯亮蓝染色法) h 14
3.4.1标准曲线的绘制 h 15
3.
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