毕业论文：《菠萝超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定》.docVIP

PAGE 精品 菠萝超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 重庆师范大学 生命科学学院 生物科学 指导教师： 摘要：本文采用硫酸铵分级沉淀，透析，DEAE－纤维素A－52离子交换柱层析从菠萝中分离纯化SOD并采用Folin－酚法测蛋白质含量，邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活性，得到酶的比活力为326.47 u/mg·pr，回收率为30.45 %，提纯倍数18.40 的SOD.同时得到了电泳纯一的SOD。并且分别研究了不同pH值、温度对菠萝SOD活性的影响。结果表明：菠萝中SOD的活力在20-60℃和pH 7.8—8.6范围内稳定。且在温度为25℃，pH为8.2的条件下活力最大。这一研究提供了从高等植物中提取SOD的有效方式。 关键词：超氧化物歧化酶；菠萝；邻苯三酚自氧化；活性测定 The Measurement of Activity of Pineapple SOD Grade 2003 Biology Science Chongqing Normal University Lianghui Tutor:Xuping Abstract:In the paper,Superoxide dismutases (SOD) from pineapple was purified by a combination of ammonium sulfate fractionation,dialysis and DEAE-cellulose A-52.The purified enzyme was a highly homogeneous protein with the specifec activity of 326.47u/mg·pr. The yield rate is about 30.45 %,and the multiplication is as high as 18.40 times.The results showed that the enzyme was a manganese superoxide. And we measured the enzyme in different pH，temperature．The results showed that：the enzymatic activity of pineapple is stable within the temperature 20—60℃ and pH 7.8—8.6. In the condition of T=25℃, pH=8.2 is confirmed to be the best .This study provides an effective approach for SOD research on higher plants. Key Words:Superoxide dismutase;pineapple;pyrogallot autoxidation;activity measurement. 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,简称SOD），是一类广泛存在于生物体内的金属酶，能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应，平衡机体内的氧自由基，SOD是一类重要的自由基清除剂，它催化超氧阴离子自由基O2.-与H+发生歧化反应，生成H2O2和02，反应式如下： 过氧化氢在过氧化氢酶的作用下进一步分解生成H2O和O2，消除O2.-等中间物的毒性。由于O2.-性质活泼，极具破坏作用，因而当机体内有过多O2.-积累时可诱发多种疾病。SOD作为体内自由基的有效清除剂，能使自由基的形成和消除处于动态的平衡，从而抵御O2.-的毒害作用[1]。因此，SOD已成为化学及生物化学研究领域中热门的研究课题。作为生物体内超氧阴离子自由基的清洁剂，SOD在防辐射、抗衰老、消炎、抑制肿瘤和癌症、自身免疫治疗等方面显示出独特的功能，在医学、食品、化妆品等领域得到越来越多的应用[2]。目前，世界各地学者对SOD的研究方兴未艾，深入研究SOD不仅有着重大的理论意义，也有着重大的实际应用价值。已开发的SOD资源有动物血、刺梨、麦叶、果蔬及微生物等。 目前，我国主要是从动物血液中提取，并已从牛血中成功地获得高纯度的Cu,Zn—SOD，国外药用S0D系从牛血中提取，但动物饲养容易受到饲料、疾病（如疯牛病）及饲养环境等因素的影响，而用植物原料提取SOD前景广阔。特别是近年来SOD功能果品系列产品开始流行，其是纯天然食品，没有任何副作用，无污染，无残毒。人们在食用美味果品的同时，又获得了当前最流行的保健食疗品。如SOD猕猴桃，SOD草莓，SOD柑橘。对水果中SOD活性的测定已成为必要，而菠萝是深受人们喜爱的水果之一，