绢丝昆虫野桑蚕与柳蚕卵黄原蛋白的研究-特种经济动物饲养专业毕业论文.docxVIP

中文摘要本论文包括两部分主要内容。第一部分是野桑灏卵黄原蛋白的鉴定与cDNA 中文摘要 本论文包括两部分主要内容。第一部分是野桑灏卵黄原蛋白的鉴定与cDNA 序列鲍分撰，以及襄黄鳃放憋硬究。利用SDs—PAGE襄Wostefn blo瞧ng熬方法 分析鉴定了野桑蚕卵黄原蛋白是由大小两个亚基组成，根据分子量marker得出 分子量分嗣为175 kD帮42蠡D。对不同整嗣稻不藏时期野黎蚕盎滚瀚sDS+淞GE 分析滥明了，野桑蚕卵黄原嚣白存在性别、时期的特异性。通过对孵桑蚕吐丝期 开始至第5同的雌体脂肪体总RNA的含量进行了比较得出，从吐丝期开始割第 5只逐濒递蜷，与黪桑蚕蛉廒渡中熙黄原蛋囱懿含爨蛉变化是一致魍。剥崩昆虫 卵黄原蛋白进化上的保守憾，根据家蚕的Vg cDNA序列设计4对特异性引物在 鹭豢蚕翁总斟A逡零亍露pCR季广增，分鬟鬻翻了4条10∞bp左右静eDNA片段； 对于3’．end和5’一end进行RAcE扩增，分别得到了2条looObp左右的cDNA片 段，根据cDNA片段的重复性，从而解析黯j野桑鲞卵黄原骚白cDNA全序列。 该序列含有5754碱基，走一令oRF维残，缡鹃17鹳个氨基酸，努黄原蛋白兹 氨基酸序列和cDNA序列与家蚕的同源性分别为97，6％和98．1％。含有特定的酶 镯识翻结构RSRR，努黄藩鬃自静体被酶韬为大小两个亚鏊，根据氨綦酸捺算静 相对分子质量分别为161．57l kD和40．794 kD，如果考虑到翻译后的修饰，这与 sDS．P_AGE的结果魑吻合的。该序列含有一个多聚丝氨酸区。出现在切割位点后 弱17氨基酸处，DGQR穰GlCG分别出残在第158l莘爨1597氨基骏处，C求蠛 含脊6个保守的半胱氨酸。根据已缀解析的18种昆虫卵黄原蛋白的氯基酸序列 褥逡了系统树，结栗涯疆了跷虫郛黄原蛋自的一缀绐构在进纯上其商缀好的保守 性，尤其是5种绢熊昆虫卵黄原蛋白。它们的氨基黢序列阍源性与RAPD分栀 的结果是一致的。通过家蚕与野桑蚕卵的内容物的SDs．PAGE，分析了野桑蚕卵 黄蛋自主要有露黄磷蛋叁(V攮)，舞难冥性爨鑫(毯韶)霹30K蛋鑫缝残。遥过 Native—PAGE分析推定了野桑蚕卵黄原蛋白在天然状态下的分子量约为440kD。 第二部分是襁蚕生物攀特注以及舜黄原蛋白的签定。柳蚕(爿cf。瓣∞f跚P H曲flor)是吐丝结茧的经济鼹虫之～，属鳞翅目，大蚕蛾科，国内外对其耀关的 研究较少，作为一种好生绢丝昆虫，对其研究具有很熏要的意义。本文通过嶷内 饲养的方法，观察了柳蚕的生物学特性，在台肥地区幼虫四眠五龄，二化性，蛹 饲养的方法，观察了柳蚕的生物学特性，在台肥地区幼虫四眠五龄，二化性，蛹 滞育，全龄期达40 d以上。通过扫描电子显微镜观察了柳蚕卵孔的显微特征， 对其形态进行了描述，并与其它野蚕进行了比较。邋过SDS．PAGE积Weste融 blo拄搬g鉴定了樱蚕趵露黄魇蛋岛是|薹!l大小两个甄基缀残，分子蘩分搿为{75 kD 和45 kD，存在缝织、时期、性剽表达的差异性。 关键词：野桑蚕 柳蚕 鳃黄愿蛋白鉴定 c￡噬焱序列分析 生物学特性 ABSTRACTThis ABSTRACT This mes强con墩ins{wo m菇of parts The 螽rst part is也e research of identi6cation of vitellogenin and analysis of its cDNA sequenco，and rese鲫ch of composition of yolk protei诖遮丑om妞r掰删妇r加口M∞re．Th嚣la塔e s曲un娃and smali subun建ofviteiiOgenin in．·召b挣?丧影茁，托盘搿d，办敛are identi矗ed t心ough SDS—pA(iE and Westem bIotting，which molecular weight are about 1 75kD and 42 kD fespectiVely based on殛g酿nlolecule w《曲t mark能T11e vitellogen浊法haemo重ym砖 have exp羚ssion di＆rence洒di鼠持nt sexes a11d times The tendency to change of total RNA in the female fat body of嚣Dm最肛川d咒盔l，胁口丘Dm spinning day 0 to day 5 is consistent w{瞧也融of vitellogen濂浪haemolymph of female sil|【worms．Sovefal primers a∞designed