木薯!!羟腈酶的克隆表达及其初步应用-微生物学报-中国科学院.PDFVIP

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2019-05-25 发布于天津
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木薯!!羟腈酶的克隆表达及其初步应用-微生物学报-中国科学院.PDF

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卷期生物工程学报 ! ! %’(!)(! 年月 #$$! ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$! - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 木薯羟腈酶的克隆、表达及其初步应用 !! 程树华严共鸿吴襟孙万儒（中国科学院微生物研究所，微生物资源前期开发国家重点实验室，北京） !$$$4$ 摘要木薯羟腈酶是一种催化羟腈化合物分解和合成的裂解酶，它在不对称合成手性羟腈化合物和手性药物 0 等方面具有广泛的应用前景。通过从木薯叶组织总中扩增出羟腈酶基因的序列，并将其 ?50@A? ?)B 0 C)B 克隆于质粒。序列分析表明，克隆的基因和文献报道的个木薯羟腈酶的序列不完全一致，可能是 @EA3F G C)B D 木薯羟腈酶基因家族的新成员。通过一系列步骤，将获得的羟腈酶基因序列插入表达载体，在大 0 C)B 95G$+ D 肠杆菌获得高效表达。每升发酵液获得单位的羟腈酶，粗酶液的比活为／蛋白质，并首次利用热变性 #!$$ 4H2-: I 法纯化重组羟腈酶。重组羟腈酶催化合成的（）扁桃腈的值达，转化率为。 J0 66 32H#K 34H#K 关键词木薯羟腈酶，羟腈化合物，手性 0 中图分类号文献标识码文章编号（） L4 B !$$$0G$1!#$$!$!0$$40$1 药理学研究的深入发展和药物作用机理的不断的氨基酸侧链、沙丁胺醇、细胞第二信使神经酰胺、阐明，使人们认识到药物分子结构中手性原子的空受体阻滞剂和抗焦虑药物。催化的分解反应用于 0 # 间构型，与其临床疗效存在密切的联系，往往某一构消除木薯等含氰食品或饲料的毒性，因此M)Q在型的同手性（）药物的药效更好、副作精细化工、医药、食品、农业和畜牧业等方面具有广 M:N;.+’;O /