豁痰祛瘀法对糖尿病大鼠早期内耳病变中耳蜗细胞凋亡的影响-中医五官科学专业论文.docx

成都中医药大学博士学位论文豁痰祛瘀法对糖尿病大鼠早期内耳病变中 成都中医药大学博士学位论文 豁痰祛瘀法对糖尿病大鼠早期内耳病变中 耳蜗细胞凋亡的影响 摘要 目的： 本课题通过研究豁痰祛瘀法对四氧嘧啶(Anoxan)糖尿病大鼠 早期内耳病变中细胞凋亡的防护作用，初步探讨糖尿病导致内耳病变及耳 聋的可能机制及豁痰祛瘀法对其影响。 方法： 采用四氧嘧啶(Anoxan)腹腔注射诱发糖尿病内耳病变大鼠模 型，同时用中药复方高、低剂量灌胃治疗，并设立空白组、模型组、西药 都可喜组(都可喜灌胃)、西药复合组(都可喜+优降糖混合灌胃)，运用耳蜗 细胞分离技术、细胞培养、免疫组化、激光共聚焦显微技术、原位杂交、 ABR、TUNEL、电镜等先进技术和研究手段，首次全面地观察了豁痰祛瘀 法对四氧嘧啶诱发糖尿病耳聋大鼠早期的防治作用；首次从细胞因子、信 号传递等方面对豁痰祛瘀法改善糖尿病大鼠耳蜗细胞的凋亡的防治作用 机理进行了深入、系统的研究。 结果： 豁痰祛瘀法改善糖尿病耳聋大鼠饮食、饮水、尿量、毛色等 一般状态。豁痰祛瘀法可改善血糖、血液流变学指标，降低糖尿病大鼠血 脂水平；提高糖尿病大鼠ABR阈值；降低耳蜗外毛细胞内游离C铲+水平： 一氧化氮合酶0呵os)、原癌基因(e-jun)、死亡因子(fas)在大鼠外毛细胞、螺 旋神经节细胞、血管纹细胞处等有阳性表达，中药复方组阳性表达低于模 型组fPO．05)；用原位杂交法观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)受体 基因在糖尿病大鼠内耳支持细胞处有明显表达，而正常大鼠耳蜗组织此部 位没有表达；TUNEL可以见到糖尿病大鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞、 血管纹内皮细胞出现凋亡细胞，而正常组无阳性凋亡细胞，‘模型组TUNEL 阳性细胞数均明显高于中药复方组0．cO．05)，电镜下可见凋亡的螺旋神经 节细胞。 结论： 糖尿病引起的耳蜗及神经损害，可能与糖尿瘸血液高凝状态 成都中医药大学博士学位论文有关。豁痰祛瘀中药能缓解糖尿病大鼠内耳微血管病变，改善微循环障碍， 成都中医药大学博士学位论文 有关。豁痰祛瘀中药能缓解糖尿病大鼠内耳微血管病变，改善微循环障碍， 缓解血管壁增厚及管腔变窄状况，从而延缓了内耳病变的进程：豁痰祛瘀 中药能够抑制糖尿病导致的耳蜗外毛细胞、螺旋神经节细胞等细胞的凋 亡，改善昕功能。 关键词： 豁痰祛瘀法 糖尿病内耳病变 耳蜗 外毛细胞 细胞因子细胞凋亡 2 成都中医药大学博士学位论文Effect 成都中医药大学博士学位论文 Effect of the eliminating phlegm and removing blood stasis method on the early Diabetic Inner ear in Cochlea of Rat Pathological Apoptosis Abstract Purpose：To explor the the protecfive effect of the eliminating phlegm and removing blood stasis on apoptosis by inner ear pathological of the early diabetic rat induced by Alloxan，and preliminarily probe into the possible inner ear pathological and heating loss induced by machnism of diabetes and effect ofThe eliminating phlegm and removing blood stasis 011 this disease． Method： Induce diabetic hearing loss rats models by intropetitoneal 画ection of middle dosage Alloxan．Treat the diabetic hearing toss rats with high and low dosage of The eliminating phlegm and removing blood stasis liquid respectively through tube feeding and at the sarne time set up the control group、the diabetic model group、west medicine group(glibeclamide)and complex west medicine group(glibeclamide and duxn)，some．technolo