课件：第三十四章抗微生物药物和敏感性试验.pptVIP

纸片法药敏试验抑菌圈直径与结果解释的标准 抗菌药物与细菌 纸片含量 抑菌圈直径：mm 相应MIC μg/ml 耐药 中介度 敏感 耐药 敏感 丁胺卡那霉素 30μg ≤14 15-16 ≥ 17 ≥32 ≤16 氨苄青霉素 测肠杆菌 10μg ≤11 12-13 ≥ 14 ≥32 ≤8 测葡萄球菌 10μg ≤ 28 — ≥ 29 测嗜血杆菌 10μg ≤19 — ≥ 20 ≥ 4 ≤0.25 测肠球菌 10μg ≤16 — ≥16 ≤ 2 2019 - * E 试 验 （一）原理 E试条是一条 5mm×50mm的无孔试剂载体，一面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有读数和判别的刻度。将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗生素抑制细菌的特定浓度,又称抑制浓度（IC），它与MIC呈高度相关。 2019 - * 2019 - * （二）细菌接种和加样 使用厚度为4mmMH琼脂平板，用0.5麦氏浓度的对数期菌液涂布，待琼脂平板完全干燥，用E试验加样器将试条放在已接种细菌的平板表面，试条全长应与琼脂平板紧 密接触，试条MIC刻度面朝上浓度最大处靠平板边缘。 2019 - * （三）结果判断和报告 读取椭圆环与E试验试条的交界点IC值。 与NCCLS的稀释法MIC参考值高度相关。 2019 - * 四、药物敏感试验结果解释 “敏感”即表示测试菌可被测定药物常规剂量 给药后在体内达到的血药浓度所抑制 “耐药”即表示测试菌不能被在体内感染部位 可能达到的抗菌药物浓度所抑制，临 床治疗无效。 “中介”者提示该细菌对常规用药体液或组织 中的药物浓度的反应率低于敏感株， 使用高于正常给药量有疗效。 2019 - * 五、自动化仪器检测 Viter－ATB系统和Microscan是半 自动或全自动细菌鉴定和药敏系统， 通过系统中药敏专家系统可报告分离 菌的药敏结果。 2019 - * 第三节 细菌耐药性和产生机制 一、细菌的耐药性 对某种抗菌药物敏感细菌变成对该药物 耐受称细菌耐药性。 它可分为天然耐药和获得性耐药，前者是通过染色体DNA突变而致，后者往往是由质粒、噬菌体及其他遗传物质携带外来DNA片段导致产生的耐药性。 2019 - * 突变可由细菌自发产生或在X线等物理因 素或化学物质诱导产生，一般只对一种或两 种相似药物耐药，在细菌耐药性上不占主要 地位。 获得性耐药可通过接合、转化。转导、转换形式产生耐药 。 2019 - * 二、细菌耐药性的生物化学机制 1. 产生β－内酰胺酶，水解药物β－内酰 胺环而失去抗菌活性。 2. 产生钝化酶使抗生素失活，钝化酶有三类： ① 氨基糖苷类钝化酶 ； ② 氯霉素乙酸转移酶； ③ 红霉素酶和其他灭活酶。 2019 - * 3.青霉素结合蛋白改变，导致对抗生素的 亲和力下降 。 4.药物作用靶位的改变使抗生素不易结 合产生耐药性。 5.抗菌药物渗透障碍，如外膜蛋白减少 和药物外排作用等。 6.代谢途径的改变 。 2019 - * 第四节 细菌耐药性检测 一、特殊菌耐药性表型检测 （一）耐药筛选试验：琼脂筛选试验 以单一药物单一浓度检测某种细菌的耐药性。 在含一定浓度测试药物的特殊培养上，点种0.5麦氏比浊度直接菌落配制细菌悬液，35℃孵育24h后观察平板上是否有菌落生长识要有1个菌落生长，均视为耐药。 临床上常用于对耐甲氧西林葡萄球菌、耐 万古霉素肠球菌，对庆大霉素或链霉素高水平 耐药的肠球菌的检测。 2019 - * （二）折点敏感试验 仅用特定抗生素浓度（敏感、中介或耐药