汉族人群HMGCR基因多态性和晚发型阿尔茨海默病的相关性研究-神经病学专业论文.docxVIP

目 目 录 一、摘要 ．1 (一)中文摘要 ．．1 (二)英文摘要 3 二、正文 5 (一)前言(一)日U舌 ．55 (二)材料和方法 8 1．研究对象 ．8 1．1研究对象来源 8 1．2 LOAD的入选和排除标准 8 1．2．1 LOAD患者的入选标准 8 1．2．2 LOAD患者的排除标准 8 1．3健康对照的入选和排除标准 ．．9 1．3．1健康对照的入选标准 9 1．3．2健康对照排除标准 9 2．实验材料 9 2．1仪器和材料 9 2．1．1主要仪器 ．．9 2．1．2实验试剂 10 3．实验方法 1 1 3．1标本收集 ．11 万方数据 3．2 3．2 DNA提取 1 1 3．3 DNA的质量及浓度测定 12 3．4嬲C足基因及么尸∞基因分型 ．12 4．统计分析 ．．14 (三)结果 15 1．研究对象的一般特征 ． 15 2．嬲C尺基因rs 3846662等位基因和基因型的分布 15 2．1单因素分析 。。15 2．2多因素分析 。16 (四)讨论 ．16 (五)研究结论． ．21 (六)参考文献 22 三、综述 26 (一)综述 ．．26 (二)参考文献 3l 四、攻读学位期间发表文章情况 ．34 五、致谢 ．．35 万方数据 大连医科大学硕士学位论文汉族人群HMGCR基因多态性和晚发型阿尔茨海默病 大连医科大学硕士学位论文 汉族人群HMGCR基因多态性和晚发型阿尔茨海默病 的相关性研究 硕士生姓名：常小龙 指导教师：谭兰教授 专业名称：神经病学 摘要 背景阿尔茨海默病(Alzheimer’S disease，AD)是发生于老年和老年前期的一种慢性 神经精神退行性疾病，是最常见的痴呆类型，占所有痴呆类型的60％到80％。随 着世界老年人人口的增长，预计到2050年全球65岁以老年人将增加三倍，阿尔 茨海默病患者的数量将增加一倍。AD的病因和发病机制尚不清楚，目前研究领域 的假说有B．淀粉样蛋白学说、tau蛋白学说、胆碱能学说、炎症因子学说、信号转 导学说、胆碱能学说、炎症因子学说、高胆固醇学说、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 信号转导学说等等。由于没有一种机制能够完全解释AD的发生和发展，目前仍 然缺乏有效的治疗方法且之前多项相关的临床药物试验都以失败告终，对于AD 的研究已经逐渐转向了临床前期的干预和预防。一些回顾性横断面研究表明他汀 类药物减少AD的患病风险高达70％。HMGCR是脑内胆固醇合成的限速酶，是 他汀类药物的作用位点。Rs3846662可以通过对结合位点结构的改变从而调节 HMGCR exon 13的跳读。最小等位基因A与A13 HMGCR mRNA的数量和占比增 加相关，而A13 HMGCR mRNA的活性往往较低或丧失，且A13 HMGCR mRNA 的比例增多可能与他汀在AD中的疗效不佳有关。近期有研究表明HMGCR内含 子13 SNP的Rs3846662 A等位基因可以明显推迟LOAD的发病年龄，且减少轻度 认知功能减退向AD的转化。 目的为了探讨在北方汉族人群中，与胆固醇代谢相关的HMGCR基因的单核苷酸 多态性(SNP)是否与迟发性阿尔茨海默病(LOAD)相关。 方法本研究为一项大规模病例对照研究。选取2334例性别和年龄匹配的北方汉 族人(其中病例组984例，对照组1350例)作为研究对象，对HMGCR rs3846662 单核苷酸多态性进行研究。应用聚合酶连反应．连接酶测定反应(PCR．LDR)技术， 对位于内含子13的rs3846662候选位点进行基因分析。应用student．t检验、卡方 万方数据 大连医科大学硕士学位论文检验(chi．square 大连医科大学硕士学位论文 检验(chi．square test)对受试者一般特征及基因型和等位基因进行比较，进而在在 校正性别、年龄和APOEe4等位基因后，使用Logistic回归进一步分析rs3846662 与AD发病风险的关系。最后根据APOEe4携带状态进行分层分析，进一步探讨 rs3846662与AD的发病风险以及他汀类的治疗作用之间的关系。 结果总体样本中，病例组和对照组HMGCR单核苷酸多态性位点rs3846662的基 因型频率分布差异有统计学意义(P=0．003)，而rs3846662的等位基因在两组间的分 布无统计学差异(P=O．614)。在校正了性别、年龄和APOEe4等混杂因素后，只有 在显性模型中，rs3846662可显著降低AD的发病风险。(OR=0．796，P=0．02，95％ CI_『O．657，0．965])。进一步依据APOEe4携带状态进行分层分析，结果显示最小等 位基因A只在APOEe4非携带者具有保护作用(OR--0．735，P=0．005，95％ CI=[0．593，0．912