光纤传感结合微顺序注射-阀上实验室光谱法测定大鼠肠灌流液中H2S含量-分析化学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 新疆师范大学学位论文原创性声明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研 究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和 集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人 承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 关于论文使用授权的说明 学位论文作者完全了解新疆师范大学有关保留和使用学位论文的规定， 即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属新疆师范大学。学校 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文 被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、 缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。（必威体育官网网址的学位论文在解密后遵守此规 定） 必威体育官网网址论文注释：本学位论文属于必威体育官网网址在 年解密后适用本授权书。 非必威体育官网网址论文注释：本学位论文不属于必威体育官网网址范围，适用本授权书。 本人签名： 日期： 导师签名： 日期： 万方数据 万方数据 摘要 目的：硫化氢（hydrogen sulfide，H2S）是一种有刺激性气味并污染环境的 有毒气体。但近年来研究表明，H2S 是继 NO 和 CO 之后的第三种气体信号分 子，能够自由的通过细胞膜，是一种神经调质，在哺乳动物体组织内和细胞内 起到了许多的生理和病理作用，因此，受到科学界广泛关注。本研究旨在探索 建立在线、灵敏、快速测定大鼠肠灌流液中 H2S 的定量分析方法，为有效地测 定哺乳动物体内 H2S 含量提供参考依据和实施案例。 方法：采用 Na2S 作为 H2S 供体，将光纤传感技术与微顺序注射-阀上实验 室（Micro Sequential Injection lab-on-valve，μSIA- LOV）相结合，在进样体积 为 50μL 的条件下分别采用钙黄绿素-铜（Ⅱ）体系荧光恢复法、荧光素汞荧光 猝灭法和亚甲蓝法测定大鼠肠灌流液中 H2S 含量，并对试剂浓度、试剂用量、 反应 pH 值、反应时间、产物稳定性和检测流速等分析条件进行探索和优化。 结果：（1）钙黄绿素-铜（Ⅱ）体系荧光恢复法：以 200μL pH=8.0 的磷酸 盐缓冲液为载液，1.0×10-5 mol/L 钙黄绿素 50 μL，1.0×10-5 mol/L 硫酸铜 50 μL； 测定大鼠肠灌流液中 H2S 的线性范围为 1.0×10-5mol/L ~ 6.0×10-5mol/L，进样体 积 50 μL，检测流速 30μL/s ，精密度为 3.3%，检测限为 5.4×10-6 mol/L，供试 品中 H2S 含量为 4.1×10-5mol/L，平均回收率为 91.1%，分析频率为 40 样/h。（2） 荧光素汞荧光猝灭法：以 100 μL 0.1mol/L NaOH 溶液为载液，1.0×10-5 mol/L 荧 光素汞 50 μL，进样体积 50 μL，检测流速 25μL/s ，测定大鼠肠灌流液中 H2S 线性范围为 5.0×10-6~1.0×10-4 mol/L，精密度为 3.8%，检出限为 4.1×10-7 mol/L， 供试品中 H2S 含量为 6.6×10-5mol/L，平均回收率为 98.2%，分析频率 45 样/h。 （3）亚甲蓝法：在酸性条件下，以 100μL 水为载液， 0.05mol/L 醋酸锌 50μL， 1.0×10-3 mol/L N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐 50μL，0.1 mol/L 的氯化铁 50μL，反 应生成亚甲蓝在 663.49nm 处测定吸光度，进样体积 50 μL，检测流速 5 μL/s， 测定大鼠肠灌流液中 H2S 的线性范围为 2.0×10-5~4.0×10-4 mol/L，精密度为 1.9%，检出限为 4.7×10-6 mol/L，供试品中 H2S 含量为 1.62×10-4mol/L，平均回 收率为 101.7 %，分析频率 20 样/ h。 结论：将光纤传感技术与微顺序注射技术相结合，利用两者的特点和优势， 采用荧光分析技术和亚甲蓝法，能够快速、准确地测定大鼠肠灌流液中 H2S 的 含量，达到了预期目的。不仅为光纤传感与微顺序注射技术的结合应用提供了 技术参考，也为生物样品中 H2S 的在线、灵敏、快速分析方法的建立奠定了基 础。 关键词：硫化氢；光纤传感；微顺序注射-阀上实验室；荧光法；亚甲蓝法 I Abstract Objective: Hydrogen sulfide (H2S) is a kind of pungent toxic gases and environmental pollution. However, recent studies ha