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动物实验基本技术及影响动物实验的因素 三、 分类: 1.按机体水平:整体实验和离体实验。具体分为亚细胞、细胞、组织、器官、整体动物和无损伤动物等水平的实验。 2.时间:急性实验(2天以内)、亚急性实验(1~4周)、慢性实验(2~6个月或更长时间甚至整个生命期) 四、方法:生理学、病理生理学、药理学、病理解剖学、组织学、微生物学、免疫学的动物实验方法等等。 第二节 动物实验前的准备 (二)实验单位随机分为三组 分组情况 (二)耳缘剪孔法:是在动物的耳边缘剪出不同的缺口或打成不同的小孔进行标记的方法。为防止孔、口愈合,一般在打孔后用消毒的滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或剪切的位置和孔数代表编号,一般在耳内按上、中、下打孔,分别代表1、2、3,在相应位置剪缺口代表4、5、6,剪两个缺口代表7、8、9,无孔或缺口为10。本法规定右耳代表个位数、左耳代表十位数。 (三)烙印法:用烙印钳将号码烙印在犬等大中型动物无体毛或明显部位。 大、小鼠等小动物可用刺针在动物耳上刺号,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在针刺处涂抹。烙印前,最好对烙印的部位预先用酒精消毒,操作时要注意防止感染。 (四)号牌法:用特制的金属号牌固定在实验动物的耳上,大动物可系于颈项部,固定号牌时要注意避开血管。 (五)笼子编号法:不在动物身体上作标记而把装动物的笼子进行编号,也叫替代法。 第三节 动物实验的基本操作 一、实验动物的抓取与固定 二、实验动物被毛去除法 三、实验动物的麻醉 四、实验动物给药途径与方法 五、实验动物采血和采液方法 3、手术固定法:用乙醚等麻醉药品麻醉后,用长20~30cm的线绳分别系在四肢上,再把系在四肢的线绳分别系在固定板四角的钉子上,并且在头部上颚切齿的地方牵一根线绳达到完全固定。 4、在尾静脉给药时,先根据小鼠的大小选择合适的固定器,打开鼠筒盖,把小鼠放在里面,只露出尾巴;或者用倒放的烧杯将鼠扣住,尾巴自烧杯凹口处露出,并压住,即可进行操作。 (二)、大鼠的抓取与固定 1、抓取方法:4~5周龄以内的大鼠同小鼠;周龄较大的大鼠其尾部皮肤容易被剥脱,所以用左手从背部中央到胸部捏起来抓住。抓取时最好带防护手套,但手套不宜过厚。 2、手固定法:抓取大鼠的方法类似小鼠,即用左手的拇指、食指和中指抓住颈背部皮肤,小指和无名指挟住尾部牢牢固定;或左手按住抓起大鼠的时候,把食指放在颈背部,拇指及其他三指放在肋部,食指和中指挟住左前肢,分开两前肢带起来,右手按住后肢固定;还有一种方法,张开虎口,迅速将拇指、食指插入腹下,虎口向前,其余三指及掌心握住大鼠身体中段,并保持仰卧体位,然后调整左手拇指位置,紧抵在下颌骨上进行实验操作。 3、手术固定法:同小鼠。 4、尾静脉给药或采血时同小鼠。 (三)、豚鼠的抓取与固定 1、抓取方法:抓取幼小豚鼠时,用手捧起来;成熟的大豚鼠,用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野,更不能抓取腰腹部,这样容易造成肝破裂而死亡。 2、手固定法:⑴将左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧,拇指和无名指放在肋部,分别用手指夹住左右前肢抓起来。⑵反转左手,用右手的拇指和食指夹住右后肢,用中指和无名指夹住左后肢是豚鼠整体伸直成一条直线。⑶一个人固定操作时,坐在椅子上,用右手拿着豚鼠的后肢夹在两腿之间,用大腿代替右手夹住。 3、手术固定法:同大、小鼠。 (四)、家兔的抓取与固定 1、抓取方法:用一只手大把抓住颈背部皮肤提起来,另一只手托住其臀部,让其重心落在托其臀部的手上,运送时,可抓住颈肩部皮肤抱着兔子运送。 2、手固定法:在灌胃给药时,人坐在椅子上,用一只手抓住颈背部皮肤,另一只手抓住两后肢放在两腿之间,大腿夹住兔子的下半身,用空着的手抓住两前肢固定之,抓住颈背部的手同时捏着两只耳朵,不让头部转动。 3、固定器固定法:耳静脉给药或采血时用盒式固定法;从颈动脉采血或手术实验时用此固定法。 (1)盒式固定法:把兔子放在盒子里,只露出头部,用转扭拧固定器固定家兔。 (2)台式固定法:将麻醉的兔子仰卧,用纱布条依次将四肢捆绑固定于固定台的两侧,然后把头部放在金属制的首枷和咀环上固定。 (五)、犬的抓取与固定 1、抓取方法:先给犬带上系有铁链条的脖套,对于性情凶猛的犬,要用特制的钳式长柄犬夹夹住犬颈部将犬按倒后,再系脖套和链条。 2、手固定法:首先绑住犬嘴,方法是饲养员或犬主人从侧面靠近并轻轻抚摸其颈部皮毛,然后迅速用布带绑住犬嘴,布带从下颌绕到上颌打一个结,再绕到下颌打一个结,然后将布带绕到头后颈,在颈后部再打一个结,最后打一个活结,对于未经驯服的犬,可用长柄犬夹夹住犬颈部按倒后强制绑嘴。 3、手术台固定法:麻醉后,松开布带,将犬仰卧在手术台上,先固定四肢,再固定头部
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