油茶炭疽病病原菌生物学特性研究分析.docVIP

个人收集整理 仅供参考学习 个人收集整理 仅供参考学习 PAGE / NUMPAGES 个人收集整理 仅供参考学习 油茶炭疽病病原菌生物学特性研究-生物论文 油茶炭疽病病原菌生物学特性研究 摘要：对引起油茶炭疽病地胶孢炭疽菌地生物学特性进行了研究.结果表明，该病菌在10～35℃地温度范围内均能生长以及分生孢子正常萌发，其中30℃最适宜菌丝生长和分生孢子萌发；在pH3.0～11.0范围内菌丝均能生长和分生孢子均可萌发，pH6.0最利于菌丝生长，pH5.0～7.0最适宜分生孢子萌发.连续光照有利于菌丝地生长，光暗交替有利于分生孢子地萌发.可溶性淀粉和尿素利于菌丝生长；乳糖和麦芽糖与谷氨酸地不利于菌丝生长.甘露醇和甘氨酸有利于产孢，半乳糖和硝酸钾不利于产孢；菌丝和分生孢子地最低致死温度为55℃，10min. 　　关键词：油茶；胶孢炭疽菌；生物学特性 　　中图分类号：S435.659 文献标识码：A 文章编号：1004-3020（2016）03-0040-05 　　油茶Camelliae oleifera是我国南方林区重要地木本油料树种之一，适宜在荒山、丘陵区种植.其种子榨出地食用油（茶油）素有“东方橄榄油”美誉，不仅保障我国粮油安全，而且提升人民健康水平.此外，荒山、丘陵区种植油茶，不与粮棉争地，能够改善生态环境，具有重要生态价值.在我国各产区油茶炭疽病普遍发生，引起落果、落蕾、枝梢枯死等，甚至整株衰亡，造成重大经济损失，可减产10%～30%，重病区40%～50%.近年来，随着油茶种植面积不断扩大，炭疽病危害程度越来越严重，已限制我国油茶产业健康发展. 　　该病地病原菌为胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides，但是胶孢炭疽菌分布广泛，寄主泛多，存在种问遗传多样性.杜宜新等研究发现，番木瓜炭疽病菌菌丝生长最适温度为25～28℃，分生孢子萌发地最适温度为28～30℃；最适pH为6，分生孢子萌发地最适pH为5；黑暗条件下生长速度最快；葡萄糖、乳糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉能促进分生孢子地萌发和形成；该菌地致死温度为55℃，10min.高洋等对墨兰炭疽病菌生物学特性进行研究，结果表明菌丝生长和孢子萌发最适温度为26℃，产生孢子最适温度为30℃；菌丝生长最适pH为7～8，产生孢子最适pH为7～9，孢子萌发最适pH为7；26℃下连续光照产孢量最多.目前，关于油茶炭疽病菌地生物学特性未见详细报道，需要深入了解病原菌特性，才能掌握该病害发病规律且制定科学防治技术措施.因此，本文对油茶炭疽病菌地生物学特性进行研究，以期为病害地科学防治提供科学依据. 　　1 材料与方法 　　1.1 供试菌株 　　按照常规组织分离方法，供试菌株YX-1、MC-8和HA-7分离于采自阳新、麻城和红安地油茶发病叶片，经单孢纯化后保存在PDA斜面上，于4℃冰箱中保存备用. 　　1.2 温度对病原菌菌丝生长及分生孢子萌发地影响 　　从活化菌株YX-1、MC-8和HA-7菌落边缘打取直径6mm地菌丝块，将菌丝块接种于PDA平板中央，每皿接种1个菌丝块，然后分别置于5℃，10℃，15℃，20℃，25℃，30℃，35℃，40℃等不同温度进行菌丝生长培养.5d后用十字交叉法测量菌落直径.每个处理设置5个重复. 　　从供试菌株YX-1、MC-8和HA-7菌落挑取分生孢子团，用无菌水稀释成浓度为1×106个/mL地孢子悬浮液.将200μL分生孢子液置于凹槽玻片，分别于5℃，10℃，15℃，20℃，25℃，30℃，35℃，40℃等不同温度进行孢子萌发试验.每个处理设置5个重复.培养12h后统计孢子萌发数，计算孢子萌发率（%）. 　　1.3 pH值对病原菌菌丝生长及分生孢子萌发地影响 　　用HCl和NaOH调节液体培养基地pH值.设置3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，9.0、10.0，11.0等9个不同pH处理.打取直径为6mm菌丝块接种在不同pH值地PDB培养液中，置于25℃恒温摇床（120rpm）条件下培养.每处理重复5次.培养5d后，收集菌丝、烘干并称重. 　　设置3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0，9.0、10.0，11.0共9个梯度pH缓冲液.取200μL浓度为1×106个/mL分生孢子液分别与5mL不同pH缓冲液充分混合，然后取200μL混合液放入凹槽玻片，置于25℃恒温条件下培养.每个处理设置5个重复.培养12h后统计孢子萌发数，计算孢子萌发率（%）. 　　1.4 光照对病原菌菌丝生长及分生孢子萌发地影响 　　用直径6mm地打孔器在活化菌株YX-1、MC-8和HA-7菌落边缘打取菌丝块，将菌丝块接种于PDA平板中央，每皿接种1个菌丝块.将培养皿置于25℃人工气候培养箱.设置连续黑暗、12h光暗交替、连续光照3个