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探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 中文摘要 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 中文摘要 目的本研究应用免疫组织化学(免疫组化)方法，观察先天性巨结肠症 (Hirschsprung’S disease，HD)患者扩张段(有神经节细胞段，NG)和痉挛段(无神 经节细胞段，AG)以及非先天性巨结肠症病人(对照组)肠壁神经组织中 BCL．2(B—lymphoma／leukemia-2)蛋白、神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule，NCAM)、神经细胞特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase，NSE)、S一100 蛋白(Soluble protein 100，S一100)的表达结果，并采用图像分析技术对肠道神经系统进 行定量分析：与苏木素一伊红(hematoxylin--eosine，HE)染色结果比较，加以分析， 以帮助诊断和了解HD的病理生理改变。 方法1、收集苏州大学附属儿童医院d,JIAb科2005--2007年先天性巨结肠病人 肠管标本31例，包括HD扩张段与痉挛段。以10例年龄与之相符的无HD患儿的 手术切除结肠标本作为对照组。所有标本均经100／60福尔马林固定，常规石蜡包埋保 存。 2、分别对HD扩张段、痉挛段、对照组肠壁组织进行免疫组织化学染色和HE 染色，计算机成像系统照相存盘，用图像分析软件(Image—Pro．Plus)判定NCAM、 S一100在HD扩张段与痉挛段单位环肌层中的阳性染色面积百分比。 结果1、先天性巨结肠扩张段HE和免疫组化染色，显微镜观察见：神经节细胞 皆存在，肌层神经纤维有不同程度的排列改变，神经节细胞大小不等；痉挛段均未见 神经节细胞。2、BCL-2在神经节细胞胞浆中呈强阳性表达，神经纤维不表达或弱阳 性，而且在未成熟神经节细胞中也表达；NSE和NCAM在肠壁肌间、粘膜下神经丛 中神经节细胞细胞及神经纤维中均有表达；S．100不表达于神经节细胞。3、定量分 析：HD痉挛肠段缺乏神经节细胞；NCAM、s一100在HD痉挛段与扩张段环肌层表 达的阳性面积率比较有明显差别(P0．05)，NCAM和S一100在痉挛段的表达明显减 少。 结论1、BCL一2免疫组化染色可很好的显示神经节细胞，尤其是未成熟神经节细 胞，较经典的NSE、S一100免疫组化染色好，对鉴别HD与先天性巨结肠症同源病 T 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 中文摘要 (HAD)有重要意义。2、NCAM对神经节细胞及神经纤维均染色，只表达于神经节 细胞胞膜上，可与BCL-2的神经节细胞胞浆染色模式互补，更利于诊断HD。3、BCL-2 在HD病变肠段表达减少，可能参与HD的发病机制。4、HD无神经节细胞段环肌层 中NCAM表达减少，可能由环肌层中神经纤维数量减少引起。5、免疫组化染色图像 分析技术可定量分析liD不同病变间的形态差异，这有助于对先天性巨结肠症的病理 学研究以及临床诊断和鉴别诊断。 关键词：先天性巨结肠Bcl一2 NSE S．100 NCAM免疫组化染色 作 者：管恩芹 指导老师：顾志成 II 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 探讨神经标志物在先天性巨结肠症肠壁的表达及意义 英文摘要 Exploring the Expression and Significance of Neuronal Makers in ENS of Patients with Hirschsprung’S Disease Abstract Objectives： We study the distribution of BCL-2 protein、NSE、S一100 protein、NCAM by using immunohistochemical markers techniques in the control group and the ganglionic bowel segment and aganglionic segment of HD group，and compare the result with HE stain group．A quantitative assessment of bowel ENS was done by using computer software to help US to diagnose and know some of the pathogenesis of HD． Methods： 1．3 1 HD patients were examined，and the specimen