pgam1在肾透明细胞癌中的表达临床意义及其功能研究泌尿外科专业论文.docxVIP

博士学位论文旁肾组织中的表达。 博士学位论文 旁肾组织中的表达。 3、采用qRT-PCR检测了PGAMl在。肾透明细胞癌细胞株RLC．310及Caki．2中 的表达。同时，行siRNA干扰片段瞬时转染，敲低PGAMl在肾透明细胞癌细 胞株RLC．310及Caki．2中的表达，并行qRT-PCR及Western blot进行验证。 4、采用流式细胞仪检测PGAMl表达下调对肾透明细胞癌细胞株RLC．310及 Caki．2中凋亡的影响：同时，采用MTT实验检测PGAMl表达下调对肾透明细 胞癌细胞株RLC．3 10及Caki．2增殖的影响。 5、通过qRT-PCR及Western blot检测肾透明细胞癌细胞株RLC．3 1 0及Caki．2 中PGAMl表达下调后，P53、Caspase 3及Caspase 9的表达情况，初步探讨 PGAMl发挥生物学功能的机制。 结果 1．PGAMI在肾透明细胞癌中的表达 首先，我们通过免疫组化检测了192例肾透明细胞癌组织及80例肾癌远端 正常肾组织中PGAMl的表达，结果表明PGAMl阳性表达主要定位于细胞质， 在正常’肾组织及肾透明细胞癌组织中均可见阳性表达。其中，正常。肾组织中， 阴性表达20例(25．0％)，弱阳性表达34例(42．5％)，中度阳性表达20例(25．0％)， 强阳性表达6例(7．5％)；。肾透明细胞癌组织中，阴性表达59例(30．7％)， 弱阳性表达45例(23．4％)，中度阳性表达71例(37．0％)，强阳性表达17例 (8．9％)：统计学分析表明，两组差异明显，具有统计学意义(表1．1，P=0．017)。 随后，我们进行了半定量分析，发现PGAMl在肾透明细胞癌中104例(54．2％) 呈低表达，88例(45．8％)呈高表达；在正常肾组织中，54例(67．5％)呈低 表达，26例(32．5％)呈高表达，统计学分析也显示两组差异明显，具有统计学 意义(表1．2，P=0．044)。 随后，我们采用qRT-PCR定量检测了三对肾透明细胞癌及配对远端正常。肾 组织中PGAMlmRNA的表达，结果表明PGAMl在肾透明细胞癌中的表达约为 正常肾组织中表达的4．2倍，明显高于正常肾组织，统计学分析表明差异明显， III 万方数据 中文摘要具有统计学意义(图1．2，P--0．004)。 中文摘要 具有统计学意义(图1．2，P--0．004)。 同时，我们通过Western blot也定量检 测了8对肾透明细胞癌及配对正常肾组织中PGAMl蛋白的表达情况，结果表明 PGAMl蛋白在肾透明细胞癌中的表达为正常’肾组织中的3．2倍，明显高于正常 肾组织，统计学分析表明差异明显，具有统计学意义(图1．2，P=O．001) 同时，我们也探讨PGMAl在肾透明细胞癌表达与临床病理特征的关系。 结果显示：PGMAl表达与年龄、肿瘤大小及T分期相关，而与性别、肿瘤位置 及吸烟史无明显相关。其中，92例年龄57岁患者中12例患者PGMAl呈高表 达，其高表达率明显低于≤57岁患者(43／100)，差异具有统计学意义(P=0．005)。 58例肿瘤直径之5 cm患者中，34例患者呈高表达，其高表达率明显高于肿瘤直 径5 cm的肿瘤患者(54／134)，差异具有统计学意义(P=0．0027)。80例T2．T3 患者中，46例呈PGAMl高表达，其高表达率明显高于T1期患者，差异明显， 具有统计学意义(P=O．008)。 2．肾透明细胞癌中PGAMl表达与患者预后的关系 依据肾细胞癌患者的预后相关资料，我们采用Kaplan．Meier法探讨了临床 病理特征与肾透明细胞癌患者预后的关系，结果表明肾透明细胞癌患者的预后 与PGAMl表达、肿瘤大小及T分期密切相关。其中，PGAMl高表达患者的平 均生存时间为48月，明显低于PGAMl低表达患者的平均生存时间(56月)， 差异具有统计学意义(P=O．000)。同时，结果显示肿瘤直径5 cm患者的术后 平均生存时间为55月，明显高于肿瘤直径≥5 cm的患者(47月)，差异具有统 计学意义(尸=0．000)。T1患者的平均生存时间为55月，明显高于T2．T3期患 者(49月)，差异明显，具有统计学意义(尸=0．000)。然而，年龄、性别、肿 瘤位置及吸烟史与患者的预后无明显相关(P0．05)。 随后，我们探讨了PGAMl表达与临床病理特征的关系对患者预后的影响。 我们发现在年龄157岁的患者中，PGAMl高表达患者预后明显差于低表达患者 (尸=0．000)；而在年龄57岁的患者中，PGAMl表达与预后无明显相关(尸= 0．203)。在男性患者中，PGAMl高表达患者预后明显差于低表达患者(尸=0．000)； IV 万方数据 博士学位论文 博士学位论文 同样