生物制药工艺学.doc

1、生物药物是以生物体、生物组织或其成份、代谢产物为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。 2、现代生物药物分四大类： （1）重组DNA药物（又称基因工程药物） （2）基因药物：以遗传物质DNA、RNA为物质基础制造的药物 一般把采用DNA重组技术或单克隆抗体技术或其他生物技术制造的蛋白质、抗体或核酸类药物统称为生物技术药物，在我国又统称为生物制品。 （3）天然生物药物 （4）合成或半合成生物药物 3、生化药物分离纯化原理： 　　总的原则：A根据分配率不同将其分配到两个或几个物相中，再用机械法分离。B在某一相中，外加一定力（电泳、离心、超滤）使混合组分分离。具体： （1）根据分子形状和大小不同进行分离。如差速离心与超离心、膜分离（透析，电渗析）与超滤，凝胶过滤法。 （2）根据分子电离性质的差异性进行分离。如离子交换法，电泳法，等电聚焦法。 （3）根据分子极性大小及溶解度不同进行分离。如溶剂提取法，逆流分配法，分配层析法，盐析法，等电点沉淀法，及有机溶剂分级沉淀法。 （4）根据物质吸附性质的不同进行分离。如选择性吸附法与吸附层析法。 （5）根据配体特异性进行分离—亲和层析法。 4、分离纯化早期和精制阶段使用方法的选择原则 分离纯化早期使用方法的选择：大处理量，相对低分辨率；精制阶段分离方法：高分辨率 第三章 生物材料的预处理、细胞破碎和液-固分离 5.细胞培养液的预处理方法。 1）细胞及蛋白质的处理：（1）加入凝聚剂（2）加入絮凝剂（3）变性作用（4）吸附 （5）等电沉淀 （6）加各种沉淀剂沉淀 2）多糖的去除可用酶解转化为单糖、黏多糖可与一些阳离子表面活性剂如十六烷基溴化铵（CTAB）和十六烷基氯化吡啶（CPC)生成季铵盐络合物沉淀去除。 3）高价金属离子的去除A离子交换法 通过阳离子交换树脂。B沉淀法 6、常用的细胞破碎方法有哪些？ 1）机械法：匀浆法、珠磨法、超声波 2）物理法：干燥、冻融、渗透压冲击 3）化学法：化学试剂处理、制成丙酮粉 4）生物法：酶解法、自溶 7、固液分离方法有哪些？ 1）、细胞及蛋白质的处理：（1）加入凝聚剂：Al2(SO4)3·18H2O、AlCl3·6H2O、FeCl3、ZnSO4、MgCO3；（2）加入絮凝剂 絮凝剂：有机高分子，易溶，链长，活性功能基团多。 影响因素：分子量、用量、pH、操作条件（搅拌）；（3）变性作用；（4）吸附 加入吸附剂：活性碳除热原 加入反应剂：相互作用形成沉淀吸附蛋白质；（5）加各种沉淀剂沉淀。 2）过滤：常规和错流 3）离心：过滤式离心和沉降式离心 8掌握萃取与反萃取，分配系数与分配比的概念。 （1）萃取：料液与萃取剂接触后，料液中的溶质向萃取剂转移的过程 （2）反萃取：将萃取液与反萃取剂（含无机酸或碱的水溶液或水）相接触，使某种被萃入有机相的溶质转入水相的过程。 （3）能斯特分配定律：一定温度、一定压力下，某一溶质在互不相溶的两种溶剂间分配时，达到平衡后；在两相中的活度之比为一常数，如果是稀溶液，可以用浓度代替活度，即： 萃取相浓度/萃余相浓度=K ，称为分配系数。 9、萃取的步骤有哪些？（1）、混合；（2）、液—液两相分离；（3）、离心萃取 ；（4）、溶剂回收 10、固相析出分离 1）.固相析出法主要包括盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、结晶法及其它多种沉淀方法等。 2）.按照一般的习惯，析出物为晶体时称为结晶法，析出物为无定形固体则称为沉淀法。 3). 结晶包括三个过程：(1) 形成飽和溶液 ；(2) 晶核形成 ；(3) 晶体生长 。 4).晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度等3个方面。 11、几道选择题 1）、 在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作 (A ) A．KS盐析法 B．β盐析法 C．重复盐析法 D．分部盐析法 2）、盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（ B ） 分辨率高 B.变性作用小 C.杂质易除 D.沉淀易分离 3）、 将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（ A ） A．亲和沉淀 B．聚合物沉淀 C．金属离子沉淀 D．盐析沉淀 4）、影响晶体大小的主要因素与下列哪些因素无关 ( D ) A．过饱和度 B．温度 C．搅拌速度 D．饱和度 12、沉淀与结晶有何不同？常用的沉淀方法包括哪些？ 结晶是指溶质自动从过饱和溶液中析出，形成新相的过程。 沉淀是溶液中难溶解的固体物质从溶液中析出的过程。 结晶法：析出物为晶体。 沉淀法：析出物为无定形固体。 沉淀方法：（1）有机溶剂沉淀法