神经生长因子在子宫腺肌病疼痛中的作用及其相关机制研究妇产科学专业论文.docxVIP

中文摘要神经生长因子在子宫腺肌病疼痛中的作用 中文摘要 神经生长因子在子宫腺肌病疼痛中的作用 及其相关机制研究 中文摘要 子宫腺肌病是一种子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层，伴随子宫局灶或弥 漫性增大的良性疾病。此病多发生于40岁以上的经产妇，患病率为5％-～70％， 子宫切除后腺肌病灶的检出率约为30％～60％。临床表现主要为经量增多和经期 延长，以及逐渐加剧的进行性痛经。子宫腺肌病患者的痛经率高达64．8哆缸77．8％， 此外还可以出现慢性盆腔痛、排便痛及性交痛。疼痛严重影响了女性的生殖健康 和生活质量，但其机制尚未完全明确。神经生长因子(nerve growth factor， NGF)是一类在疼痛过程中起到关键调节作用的神经因子，主要通过低亲和力的 P75神经营养因子受体(p75 neuro仃ophin receptor，p75NTR)与高亲和力的酪氨 酸激酶受体A(tyrosine kinase A，仃l渣)发挥生物学作用，参与疼痛发生、发展 的各个环节。研究表明NGF在内异症患者异位内膜高表达，且与疼痛相关，可能 成为内异症及腺肌病疼痛研究中的关键环节。 本课题检测NGF在腺肌病患者或动物模型子宫及脊髓背根神经节的表达变 化，研究NGF表达与腺肌病本身及疼痛程度的关系，分析可能诱发NGF变化的原 因，并通过检测NGF相关的神经植入、疼痛受体、局部炎症、中枢敏感性的变化， 及NGF对腺肌病灶内膜间质细胞增殖、凋亡、雌激素合成关键酶表达的作用，探 讨NGF参与子宫腺肌病疼痛的机制。 第一部分子宫腺肌病患者腺肌灶NGF表达与 神经植入及疼痛程度的关系 目的研究NGF在子宫腺肌病患者病灶内膜的表达及其与患者疼痛评分及病灶 局部神经植入密度的关系。 方法选择2009年3月～10月在复旦大学附属妇产科医院院行子宫切除的腺肌 病患者45例，子宫切除且否认疼痛的宫颈上皮内瘤变(CIN)IH期及子宫 中文摘要肌瘤患者共26例，所有病例均经病理组织学确诊。于术中取腺肌病患者 中文摘要 肌瘤患者共26例，所有病例均经病理组织学确诊。于术中取腺肌病患者 病灶内膜或子宫肌瘤及CIN患者在位内膜，免疫组化法显示神经生长因子 (NGF)表达；免疫荧光法显示蛋白基因产物9．5(PGP9．5)阳性神经纤 维植入；视觉评分系统(VAS)评测腺肌病患者痛经、慢性盆腔痛及性交 痛的程度。 结果腺肌病疼痛组患者病灶NGF表达强度及PGP9．5阳性神经纤维植入密度高 于腺肌病无痛组及对照组(p0．05)；腺肌病痛经重痛组NGF表达强度及 PGP9．5阳性神经纤维植入密度高于腺肌病痛经轻中痛组及对照组 (p0．05)；NGF表达强度及PGP9．5阳性神经纤维植入密度与腺肌病患者 是否出现慢性盆腔痛及性交痛无关；腺肌病患者病灶NGF表达强度与 PGP9．5阳性神经纤维密度变化具有相关性(F0．3 1，p0．05)。 结论腺肌病患者病灶处NGF高表达可能参了患者痛经的发生机制，而促进病灶 内膜神经纤维植入是其机制之一。 关键词子宫腺叽病：神经生长因子：神经植入：疼痛 第二部分NGF及其受体在子宫腺肌病小鼠子宫及 脊髓背根神经节的表达 目的使用口服他莫昔芬法建立ICR小鼠子宫腺肌病模型并鉴定； 检测NGF 及其受体在腺肌病小鼠模型子宫及脊髓背根神经节(DRGs)的表达随动 情周期及病情进展的变化。 方法新生ICR小鼠连续4d滴喂他莫昔芬为造模组，并与同龄对照小鼠分别于 42 d、8595 d、135--145 d、185～195 d、235-245 d龄处死(每组4～ 5只)，取双子宫及T13至L2脊髓背根神经节。使用苏木素．伊红染色检 测子宫病理改变；阴道脱落细胞法检测动情周期变化；逆转录．聚合酶链 反应(RT-PCR)检测子宫缓激肽受体I(BKR-1)、神经激肽1受体mKl．R) 的基因表达；免疫组化补体31(CD31)染色计算子宫微血管的密度、直 径及所占面积比；免疫组化PGP9．5及SP染色计算神经纤维密度；免疫组 中文摘要化检测NGF及其受体在子宫的表达；蛋白印迹(Western-bolt)检测子宫 中文摘要 化检测NGF及其受体在子宫的表达；蛋白印迹(Western-bolt)检测子宫 NGF及其受体蛋白水平随动情周期及鼠龄增加的变化；实时定量逆转录 聚合酶链反应(Real-time RT PCR)检测DRGs中NGF受体mRNA水平 随鼠龄增加的变化。 结果使用口服他莫昔芬法建立ICR小鼠子宫腺肌病模型的造模率为100％，且 疾病严重程度随鼠龄增加进展；85～95d及135—145d龄造模小鼠子宫肌层 微血管密度和面积比均高于对照小鼠(p0．05)；135-一145 d造模小鼠子 宫内膜及肌层PGP9．5阳性神经纤维、内膜SP阳性神经纤维植入密度高于