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青鹏软膏干预佐剂性关节炎大鼠作用研究中西医结合临床内科专业论文
天津医科人学硕士学位论文中文摘要
天津医科人学硕士学位论文
中文摘要
目的
类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、对称性多关节炎为主要 表现的自身免疫性疾病。本病呈全球性分布,在我国患病率约为0.36%,是造成 我国人群劳动力丧失和致残的主要疾病之一,被称为“不死的癌症’’。RA的主 要病理变化为关节滑膜慢性炎症,炎细胞浸润,滑膜血管新生及血管翳形成,血 管翳向邻近软骨和骨组织侵蚀,导致骨质破坏,关节畸形和功能丧失。其具体发 病机制尚未明确。由于RA属于慢性顽疾,需长期用药,但目前临床上患者应用 的非甾体类抗炎药,免疫抑制剂等缺乏长期临床用药的安全性和耐受性,治疗效 果亦不尽人意。因此寻找低毒高效的药物和剂型显的尤为重要。外用药,尤其是 软膏剂对于类风湿关节炎有不良反应小、靶向性好,长期用药安全可靠等特点, 具有广泛的应用前景。
RA属于中医“痹证”范畴,主要病因病机为风寒湿热之邪侵袭关节痹阻筋 脉,与藏医文献《四部医典》、《医药精华》等记载的寒湿凝滞筋脉所致足、大腿、 小腿疼痛肿大,屈伸困难的“冈巴、“黄水一等有相似之处。奇j下青鹏软膏为藏 族传统经典方剂,具有清热解毒、祛风除湿、活血化瘀、消肿止痛的功效,用于 治疗痛风、湿痹、冈巴、黄水等疾病。提示本药局部外用可能成为治疗RA的理 想药物。本研究以佐剂性关节炎大鼠为模型,通过观察奇正青鹏软膏高中剂量对 病程中细胞因子网络失衡,滑膜炎性增生导致的关节肿胀、滑膜血管新生及软骨 破坏等病理过程中相关因子的影响,以阐释外用药青鹏软膏对AA大鼠的干预作 用和初步机制,为该药临床应用治疗类风湿性关节炎提供科学详实的实验依据。
方法
1.建立佐剂性关节炎大鼠模型。
2.将AA大鼠分为高中剂量组,外用青鹏软膏治疗,药量分别为1.69/kg、0.49/kg, 造模2周后于右后足涂抹给药,每日2次,充分按摩至完全吸收,用药4周。 为观察该外用药作用特点,进行用药足与非用药足的自身对照及模型组对照。
3-嗵过观察高中剂量奇J下青鹏软膏对佐剂性关节炎大鼠足肿胀率、血清NO、
IL.1 B、滑膜病理改变的影响,初步探讨外用药青鹏软膏对佐剂性关节炎大 鼠免疫炎症的干预作用。
4.用免疫组织化学染色的方法检测滑膜组织中VEGF、HIF.1 n的表达,同时通 过观察滑膜病理切片血管新生情况,探讨青鹏软膏外用对滑膜血管新生的影 响。
天津医科人学硕士学位论文5.通过免疫组织化学染色方法检测关节软骨细胞iNOS、MMP一3的表达,光镜
天津医科人学硕士学位论文
5.通过免疫组织化学染色方法检测关节软骨细胞iNOS、MMP一3的表达,光镜 下观察滑膜及软骨的病理改变,探讨青鹏软膏局部外用对大鼠佐剂性关节炎 软骨破坏的影响。
争士甲:口木
1.成功建立AA大鼠模型。模型组大鼠关节红肿,尾巴结节,耳朵出现红色斑 点和结节,足肿胀率显著增高(p0.05),血清NO水平显著升高(pO.05)。 2.青鹏软膏高中剂量局部外用显著降低AA大鼠用药足肿胀率,与非用药足和 模型组比较呈显著性差异(pO.05);可有效降低血清NO水平(pO.05);用
药足大鼠滑膜病理分级与模型组间具有统计学意义(p0.05);对血清IL.1 13
水平、关节炎指数评分没有显著影响(pO.05)。 3.青鹏软膏高剂量可降低用药足滑膜组织中VEGF、HIF—l Q的表达,与模型组
和自身对照比较有显著差异(po.05),青鹏软膏中剂量显著降低用药足VEGF 的表达,对HIF.1 Q的表达有降低趋势;滑膜病理血管生成评分结果显示青 鹏软膏高中剂量抑制了用药足滑膜组织的血管新生,与非用药足和模型组比 较明显降低趋势,青鹏软膏高剂量对用药足作用尤为显著。
4.青鹏软膏高中剂量均显著降低了用药足软骨中iNOS的表达,与非用药足和 模型组比较差异显著(pO.05);用药足MMP.3的表达与非用药足及模型组
比较无显著性(p0.05);光镜下对滑膜和软骨进行病理指数分级与模型组和
非用药足比较有明显降低趋势。
结论
本实验以尾根局部注射弗氏完全佐剂成功诱导佐剂性关节炎大鼠模型,采用 自身对照与模型对照,评价外用藏药奇正青鹏软膏不同剂量干预大鼠佐剂性关节 炎的药理作用。证实:该药物可通过降低AA大鼠用药足肿胀率,抑制了促炎因 子表达,调整了细胞因子的网络失衡,干预免疫炎症;通过抑制促血管新生相关 因子的表达,减少患肢局部滑膜血管新生,并在一定程度上减缓了佐剂性关节炎
大鼠病程中的软骨破坏,从而改善了AA大鼠患肢的病情,
本实验结果提示:外用药奇正青鹏软膏对RA的干预作用,是通过直接作用 于病变局部多环节、多靶点综合作用而实现的。其作用靶向性明确,安全有效。
关键词:类风湿关节炎佐剂性关节炎青鹏软膏细胞
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