临床本科3 溶贫检测.pptVIP

第三节 溶血性贫血检测 溶血性贫血定义： 红细胞的生存时间缩短15～20天以下，破坏速度超过骨髓的代偿造血能力时，才出现贫血 发病机制分类： RBC内在因素（遗传性/先天性） RBC外在因素（获得性） 溶贫的临床表现 急性：发热、畏寒，可出现Hb尿，肾功能改变 慢性：贫血、黄疸、脾肿大、免疫指标异常，胆红素代谢异常 破碎红细胞、盔形红细胞等 一、溶贫筛查试验 1、血浆游离Hb测定正常值：50mg/L 意义：血管内溶血的指征 2、血清结合珠蛋白测定 正常值：0.7~1.5g/L 各种溶血时结合珠蛋白均可减低，严重血管内溶血明显减低，甚至测不出（血浆游离血红蛋白超过1.3g /L时）。 巨幼细胞贫血、严重肝病、口服避孕药、先天性无结合珠蛋白血症等减低或消失。 增高见于炎症、感染、组织坏死、恶性肿瘤、风湿性疾病、口服避孕药、类固醇激素治疗。 3、血浆高铁血红素清蛋白检测 正常： 阴性 严重血管内溶血时呈阳性 4、RBC寿命测定（最佳） 正常值：25~32天 51Cr同位素标记，半衰期15天，说明有溶血存在。 5、尿含铁血黄素试验（Rous test) 正常值：阴性 溶贫中阳性只占10~20% 二、 红细胞膜缺陷的检验 1、RBC渗透脆性试验 检测红细胞在不同浓度 低渗盐水中的抵抗力 RBC表面积/RBC容积比值 与RBC脆性成反比 参考值： 开始溶血0.42%~0.46% (NaCl液) 完全溶血0.28%~0.32% (NaCl液) 意义： 脆性增高 遗传性球形细胞增多症 脆性减低 地中海贫血、缺铁性贫血 2、自身溶血试验及其纠正试验 三、酶缺陷的检验 1、 高铁血红蛋白还原试验 G6PD 高铁血红蛋白还原酶 G6P NADP 还原型美兰 HbFe3+ 6PG NADPH 氧化型美兰 HbFe2+ NaNO2　 2、氰化物-抗坏血酸试验 3、变性珠蛋白小体生成试验 体外活体染色后，光镜下发现的1~2μm颗粒状折光小体。 结果：正常人30% 意义：见于不稳定血红蛋白病、G6PD缺陷症和芳香族苯胺或硝基类化合物中毒所致的溶贫。 4、G6PD PK活性测定 四、珠蛋白生成异常试验 包括血红蛋白电泳、 HbF定量测定（碱变性试验）等 五、免疫性溶血的检验 1、抗人球蛋白试验（Coombs` test） 直接法、间接法 直接抗人球蛋白试验（DAGT） 测RBC表面结合的抗体（更重要，价值高） 受检者RBC悬液+等量抗人球蛋白试剂 低速离心后观察凝集 37℃，15min Coombs` test临床意义 正常人抗人球蛋白试验直接、间接均阴性 自身免疫性溶血性贫血（温抗体型 37℃条件下作用最强 IgG）,(冷抗体型 4℃条件下进行试验 IgM) 新生儿同种免疫溶血病、SLE、RA、HD、NHL 可阳性。 2、冷热溶血试验 PNH不同时间尿样 六、PNH相关检测 属于红细胞膜缺陷，慢性血管内溶血 1、酸化溶血试验（Ham test） 特异性高，是国内外公认的PNH确诊试验 利用补体在弱酸性环境中激活，并攻击RBC膜，致溶血 。 正常人阴性，PNH阳性。 2、蔗糖溶血试验 特异性敏感性均不如Ham试验，仅做筛选。 参考值：阴性 3、蛇毒因子溶血试验 特异检测PNH 第四节 血型鉴定与交叉配血 血型定义： 红细胞系统血型： 一、ABO系统与临床意义 1、分型原则 根据红细胞膜上含有抗原和血浆中含有相应抗体分为A、B、AB、O四型 父母的血型与子女的血型关系 2、抗原 A、B抗原（含H抗原）在胚胎期已形成，出生时抗原性不强，故胎儿、新生儿定血型时凝集性差。 血型抗原终生不变。H抗原属分泌型物质，存在各组织中，以唾液为多，可辅助鉴定ABO血型。 3、抗体 抗A、 抗B、抗AB属IgG 或IgM型，天然性抗体以IgM为主，免疫性以IgG为主（如输血、妊娠后）。 O血型血清内抗体属IgG。新生儿溶血与IgG有关。 抗体也终生不变 ABO亚型 亚型是指属同一血型抗原，但抗原结构或抗原位点数有一定差异。 最多见的最有意义亚型是A型中的A1、A2 （A1A、A1B 、A2B)。 A2B含有A1抗体。 凡在血型鉴定过程中出现不明显或可疑结果时应做亚型鉴定。 4、血型鉴定 正向直接