临床常见病原体检查2.pptVIP

医院感染常见的病原体 细菌为主要病原体。 细菌的种类因时、地和人而异。 不同临床类型其感染细菌的构成比不同。 第10章 其他检测Chapter 10 Other Clinical Assays Department Laboratory Medicine Prof. Zhengjun Yi yizhengjun@126.com 提 纲 (Outline) Section 1：基因诊断(Molecular Diagnosis) Section 2：（自学）流式细胞术(Flow cytometry,FCM)及其临床应用 Section 3：染色体(Chromosome)检查 第一节 基因诊断 一、基因诊断的含义 基因诊断在基因水平上对疾病或 人体的状态进行诊断。它是以遗传物质（DNA RNA)为检查对象，利用分子生物学技术通过检查基因的结构或表达量的多少来诊断疾病的方法。这里的遗传物质即可以是外源性致病基因，如病毒、细菌等，也可以是内源性基因。 5’ 5’ 3’ 3’ d.NTPs 耐热DNA聚合酶 引物 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 退火 加入试管中 添加反应混合液及样本 变性 PCR反应原理和反应过程 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 第二个循环 4个拷贝 第三个循环 8个拷贝 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 5’ 3’ 第n个循环 2n个拷贝 基因诊断在临床医学中的应用 1.遗传性疾病的基因诊断 2.感染性疾病的基因诊断 3.肿瘤的基因诊断 4.在法医学中的应用 5.cDNA文库的建立 6.特定基因的筛选等。 第三节 染色体检查 一、染色体检查的方法 二、染色体异常及染色体病 三、XYY综合症染色体检查 四、白血病的染色体检查 BCR-ABL融合基因 PML-RARα 应用 ? DNA染色体分析 ? 三体分析 ? 染色体作图 分裂间期研究 产前诊断 CGH Metaphase Chromosom 1, FITC Chromosom 12, TRITC Chromosom 17, FITC and TRITC Nucleoli Chromosom 13q14, FITC Chromosom 21, TRITC 24 色荧光原位杂交或 M-FISH 分裂中期 核型 临床应用 出生缺陷干预工程 唐氏综合征 地中海贫血 神经管缺损 苯丙酮尿症 G6PD SNPs 感染性疾病的鉴别诊断 药物敏感性 亲子鉴定 肿瘤的分子病理学 血液病 乳癌 肝癌 胃癌 肺癌 膀胱癌 结肠癌 DNA RNA Thanks for your attention! * 教学笔记 * * * 教学笔记 * Most researchers are well versed in the performance of PCR. However, I usually emphasize that the performance of Real-Time PCR requires an emphasis on each step. STEPS 1) Prepare the Master Mixture and add all components to the reaction tube. 2) Denature the Template to generate single-stranded DNA. Usually performed at 95 oC for 30 to 60 s. 3) Annealing temperature. The temperature is lowered in order to promote the binding of the primers to its complimentary target. Generally ranges between 50 and 65 oC. * This demonstrates the power of exponential growth. Start with 2 copies, then 4 copies, then 8 copies, etc. * * * 抗生素压力 耐药菌株极少 x x 耐药菌株为主 抗生素暴露 x x x x x x x x x x 体外抗菌药物敏感试验