纤维细胞模型干预作用.PDF

doi:10.6043/j.issn.0438-0479.201801006 ·研究简报· 康复新液对转化生长因子-β1诱导人胚肺成 纤维细胞模型的干预作用 1 1 1 2 1* 徐秋颖 ，刘伟伟 ，王宝家 ，马秀英 ，高永翔 （1. 成都中医药大学基础医学院，四川 成都 610075；2. 药用美洲大蠊四川省重点实验室， 四川 成都 610000 ） 摘要：为探讨康复新液对肺纤维化细胞模型的干预作用，以转化生长因子（transforming growth factor, TGF ）-β1 诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5 构建肺纤维化细胞模型，并运用CCK8 ) （cell counting kit-8 ）法检测康复新液对MRC-5 细胞的毒性。以测得的最高不致死给药浓度 版 学 干预诱导MRC-5 细胞模型，进而通过荧光实时定量PCR（qRT-PCR ）和蛋白质免疫印迹（WB ） 科 检测细胞纤维化指标在mRNA 及蛋白质的水平变化。结果显示：TGF-β1 在10 ng/mL 的质 然 量浓度下可成功诱导 MRC-5 细胞发生纤维化，且细胞内Ⅰ型胶原 （Collagen Ⅰ）、Ⅲ型胶 自 原 （CollagenⅢ）、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF ）、层n 黏连 ( 蛋白（laminin, LN ）、纤维连结蛋白（fibronectin, FN ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle 报 actin, α-SMA ）的mRNA 表达水平均显著升高；以80 倍稀释的康复新液为最高不致死给药 学 浓度，对MRC-5 细胞纤维化模型进行干预，上述纤维化指标在mRNA 及蛋白质水平均出现 学 显著下降，与地塞米松 （Dexamethasone, DXM ）的干预效果相当。综上，康复新液可改善 大 由TGF-β1 诱导MRC-5 细胞纤维化的表型，有望被应用于肺纤维化的治疗。 门 关键词：康复新液；肺纤维化；转化生长因子；MRC-5 细胞 厦 中图分类号：R-33 文献标志码：A 肺纤维化（pulmonary fibrosis ）发生于许多不同病因引发的肺间质疾病，生理特点表现 为肺泡持续性损伤、成纤维细胞（fibroblast ）增殖及大量细胞外基质（extracellular matrix, [1] ECM ）沉积，从而导致肺组织反复破坏、修复，最终造成肺组织中的大量胶原沉积 。 康复新液是由美洲大蠊（Periplaneta americana L. ）干燥虫体的乙醇提取物制成的溶液，其 主要成分包括氨基酸（17 种以上，包含人体必须氨基酸）、多肽类（抗菌肽、咽侧体抑制 收稿日期：2018-01-04 录用日期：2018-03-05 基金项目：成都市科技惠民项目 （2015-HM01-00466-SF ） *通信作者：yxgaocd@ 神经肽、焦激肽等）、多糖类（硫酸粘多糖等）、核苷类