电化学免疫传感器测定牛奶中的青霉素（论文）.doc

《化学通报》在线预览版 HYPERLINK / 《化学通报》在线预览版 HYPERLINK / 电化学免疫传感器测定牛奶中的青霉素 武 海 a 杨维春 a 马 洁* b (a 平顶山学院化学化工学院 平顶山 467002; b 首都师范大学化学系 北京 100037) 摘 要 利用共价键合法, 将新亚甲蓝(NMB)与辣根过氧化酶 (HRP) 标记的青霉素多克隆抗体 (Ab?) 修饰于玻碳电极 表面, 制成电流型免疫传感器；考察了该传感器的电化学行为、对 H2O2 的电化学响应。结果表明，NMB 作为介体能有 效地传递电子, 传感器对 H2O2 具有很好的催化作用。用此传感器对牛奶中的青霉素进行检测, 其线性范围为 0.25～3.00 ng/mL (R＝0.984), 检出限为 0.298 ng/mL。 关键词 免疫传感器 新亚甲蓝 共价键合 青霉素 Determination of Penicillin in Milk by the Electrochemical Immunosensor Wu Hai a,Yang Weichuna, Ma Jie ? b ( aCollege of Chemistry and Chemical Engineering, Pingdingshan University, Pingdingshan 467002; bDepartment of Chemistry, Capital Normal University, Beijing 100037) Abstract An amperometric immunosensor was fabricated by co-immobilizing new methylene blue (NMB) and Horseradish Peroxidase (HRP)-labeled penicillin polyclonal antibody (Ab?) on a glassy carbon electrode through covalent immobilization. The electrochemical behaviors, the response on hydrogen peroxide of the immunosensor had been investigated. The results showed that the NMB enhanced the electron transfer between HRP and electrode and the sensor exhibited excellent catalytic activity to H2O2. The linear dependence of current on penicillin concentration in milk was in the range of 0.25～3.00 ng/mL with the correlation coefficient of 0.984 , the detection limit was 0.298 ng/mL. Keywords Immunosensor, New methylene blue, Covalently bonding, Penicillin 青霉素和一些 β-内酰胺类青霉素是抗菌性药物, 主要通过内服或外用来防治奶牛乳腺炎病。然而， 牛奶中抗生素残留超标对人体健康会造成很大的危害, 长期饮用抗生素残留超标的牛奶, 会增加人体内 细菌的耐药性, 一旦人体患病时, 往往由于耐药性菌株的存在而使治疗失败。所以对牛奶中的青霉素残 留的检测非常重要。目前常用的检测方法有: 微生物法[1,2]、高效液相色谱法[3]、气相色谱法[4]、免疫检 测法[5]等。近年来, 免疫检测法发展较快, 如酶联免疫吸附法[6]、荧光免疫[7]、放射免疫分析[8] 等等。这 些方法能够较好地对牛奶中青霉素残留进行检测, 然而由于价格昂贵或步骤复杂或条件要求苛刻，其发 展和应用受到了限制。电化学免疫传感器法是利用抗原和抗体间的高度特异性结合, 将免疫测试方法与 近代生物传感技术融为一体, 既具有免疫反应的高选择性又兼有电化学分析的高灵敏性, 已在医疗卫 生、环境等领域得到广泛应用[9]。电流型电化学免疫传感器是利用抗原抗体反应的特异性,通过具有电活 北京市自然科学基金项目(6052002 )资助 2007-09-19 收稿，2008-01-03 接受 性的介体将免疫反应转换为电流信号, 从而对抗原或抗体进行检测的一种装置。 新亚甲蓝具有共轭的平面结构, 是一种比较活泼的电子转移体, 具有良好的电化学活性，其