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改良抗酸 结核菌染色液(冷染) 0.01MPBS(ph7.2~7.4) 0.3% Triton X-100 甲醛丙酮固定液 阿利新蓝 1 % 阿利新兰醋酸液(PH2.5) 阿利新兰 1g 冰醋酸 3 ml 蒸馏水 97 ml 谢谢! 脑脊液细胞学 1、脑脊液细胞学 2、改良抗酸 3、阿利新蓝 4、ESAT-6 5、细胞损伤3项 6、病毒系列 脑脊液细胞的收集 脑脊液细胞的收集技术以细胞玻片离心沉淀法应用较广,其效果理想。具体有三种仪器和相应的三种操作流程: (1)FMU-6微型脊液细胞玻片离心沉淀器(第四军医大学研制) (2)Cytospin-2型细胞玻片离心沉淀仪(英国Shandon公司制造) (3)FCS-I型离心沉淀仪(宁夏医学院研制) 脑脊液细胞的染色 1、迈-格-姬(May-Grun-wald-Giemsa,MGG)染色法: 迈-格-姬染色法其实是瑞氏和姬氏两法合并应用的结果,对胞浆和胞核染色效果都不错,故脑脊液细胞学检查多采用此染色方法。 2、抗酸染色: 抗酸菌染色是检查结核杆菌等抗酸菌的常用方法。 3、墨汁染色: 印度墨汁染色主要用于真菌的检查,方法简便易行。 脑脊液常见细胞及临床意义 1、淋巴细胞:分小、中、大淋巴细胞,各个比例及临床意义不同,小、中淋巴细胞是正常脑脊液的主要成分,其数量增多或比例失调则有诊断意义,多见于CNS感染或非特异性脑膜刺激反应;大淋巴细胞系由小淋巴细胞激活转化而来的,也多见于CNS感染或非特异性脑膜刺激反应。 2、激活淋巴细胞:系由大、小淋巴细胞受抗原刺激转化而成,主要包括如下几种:转化型淋巴细胞形态不规则、伪足、胞膜粗糙等多见于细菌性脑膜炎(特别是恢复期)、病毒性脑膜炎、结核性脑膜炎、MS、CI、SAH等。 3、浆细胞:正常脑脊液中不存在浆细胞,他出现必有抗原刺激。多见于CNS感染,以结核性脑膜炎、脑囊虫病、病毒性感染更甚,有的认为与MS也有关。 4、单核细胞:占正常脑脊液细胞的30%—49%,和淋巴细胞的比例约为3:7或4:6,若比例失调或数量增多则为病理性,可见于脑膜非特异反应和脑组织的破坏性改变,如脑挫伤、出血、缺血、炎症等。激活单核细胞:仅占2%,增多见于CNS变性、炎性疾病、肿瘤等刺激因素。 5、吞噬细胞:如红细胞吞噬细胞、含铁血黄素吞噬细胞可以估计蛛网膜下腔出血的时间、是否是新鲜出血、穿刺时损伤出血?等。对的诊断非常有帮助。其实因为此类细胞多在出血5天后出现。 6、肿瘤细胞:原发或转移颅内肿瘤细胞、白血病细胞等。 1、病毒性脑膜炎:如单疱病毒感染早期以中性粒细胞反应为主,2天后以淋巴细胞反应为主,伴有大量的转化型淋巴细胞、浆细胞等。在淋巴样细胞胞浆中可见到特征性包涵体,有助于诊断。 2、结核性脑膜炎:在渗出期、增值期、修复期、慢性期的细胞学特点各有不同。玻片离心沉淀法细胞收集率高,相应的脑脊液中的结核杆菌收集率也提高。 细胞学 器材 FMU-6型细胞涂片离心仪 FMU-6型细胞涂片沉淀器 显微镜、载玻片、细胞计数板 试剂 瑞氏-姬姆萨染色液 缓冲液:蒸馏水 应用FMU-6微型脑脊液细胞玻片离心沉淀器放入0.5-1.0毫升新鲜脑脊液,以700rpm离心4分钟,将管内液体摔干,拔出玻片待干。 A液(染液)9滴,2分钟后加入B液3滴(比例1:3),8分钟后以流水缓慢冲洗,晾干备用。
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