富含半胱氨酸酸性分泌糖蛋白及其肽段对人系膜细胞增殖和凋亡作用的研究-内科学(肾病)专业论文.docxVIP

.岛原盹血事喃世瞩毗甜束(111-脏精鹏) 蛐唔帽瞩 缩略词表 英文缩写 英文名称 中文名称 SPARC secreated protein acidic and rich in 富含半脱氨酸酸性分泌糖 cysteme 蛋白 BSA Bovine s町um albumin 牛Jfoj商自蛋白 OAB 3，3-diamínobenzídine 二氨基联苯胶 OMEM Oulb邸ω8 Modífied Eagle medíum OMEM 培养基 OMSO Dimethylform缸níde 二lf1基亚枫 EDTA ELISA ECM ethylene díamine t础acetíc acid 创1z沪ne línked immunosorbent assay extracellular matrix 乙二肢囚乙酸 酶联免疫吸附测定 细胞外基质 GAPOH glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase 甘泊憾-3-磷酸脱氧酶 HMC humanm创angial ceIl 人系膜细胞 日应 Hematoxylín and eosin 苏水精和伊红 19AN IgA nephropathy IgA 肾病 kDa kilodalton 千道尔顿 MsPGN Mesangial prolí缸ative glomerulonephritis 系膜增1:.性肾小球肾炎 mRNA Messenger RNA 信使核糖核酸 00 。ptiωld臼lSity 光密度 PBS phosphate-buffered salíne 磷酸盐缓冲溶液 PAGE PI Polyaαyl础níde gel elωtrophoresis Propidíum íodíde 聚丙烯酌胶凝胶也泳 腆化丙昵 Rl工PCR reverse 位ans创ptíon polymerωe chain 逆转录多聚酶链式反应 SOS reaction sodíum dodecyl sulfate 十工炕基磺酸纳 Tris tris(hydroxymethyl) aminomethane 二工(轻甲篡)氮蔡甲烧 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作.除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人 已经发表或撰写过的研究成果.与我一向工作的问志对本研究所做的 任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意.本人承担本声明 的法律责任. 学位论文作者机:各?如 签字日期:气7 年』月 2 日 学位论文使用授权书声明 本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有 权保留并向回家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文 被查阅和借阅.本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手 段保梅、汇编学位论文. (必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本授权书) μ -u街足铲茹f 学位论文作者签名:均势字也 导师接名: 俨可 签字叫:如7年 b 月 3 日 捎回期 :c)何7年 4 月7 日 1f:=.阜阻式单嘲士单恤世3比(，...脏躏事) 蛐兽 富含华脱氨酸酸性分泌糖蛋白及其肤段 对人系膜细胞增殖和凋亡作用的研究 摘要 阔的 研究富含半脱氨酸酸性分 糠蛋白 (SPARC) 的全长蛋白及其 2.1 肤段对人肾小球系膜细胞 (HMC) 增殖、凋亡和细胞周期调控蛋白袋达 以及细胞外基质mRNA 表达的影响。为法 应用的技术包括嚓曦疏 (MTT) 法检测细胞增痛、流式细胞术检测细胞周期、 Westem blot 检测细胞周 期调控蛋臼 CyclinDl 和 P21w.fl 的表达、透射咆镜观察细胞形态学的变化、 Annexin VIPI 双染色方法检测细胞凋亡指数、实时荧光定量 RT-PCR 法检测 细胞外基质 (ColI，Col IV、LN 、FN) mRNA 的水平、夹心脏LISA 法对 IgAN 患者和正常人血液和尿液中 SPARC 和细胞因子 TNF-a 、IL-l tl 、矶-6 进行定意检测、免疫组织化学检测 SPARC 在 IgAN 患者及正常人肾组织 中的表达及分布等。结果 (1) SPARC 及其肤段能够抑制 HMC 增殖， 里良好的时效与量效关系; (2) SPARC 及其欣段可使 HMC 的细胞周期阻 滞在 GO/Gl期，并诱导细胞凋亡，电镜下可见典型的调亡小体; (3) SP. C 及其肤段对 HMC 细胞周期调控蛋白的表达有影响，使 CyclinDl 的 表达明显减弱、 P21W.fl 的表达明显增强; (的 SPARC 及其肤段可使细胞 外基质 ColI、ColIV、阳m刚A 的表达明显下调; (引 SPARC