敌百虫加速大鼠动脉粥样硬化模型的建立及染料木素干预-药理学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 OP PBS organophosphorus phosphate-buffered saline 有机磷酸酯类 磷酸盐缓冲液 PON rpm paraoxonase revolutions per minute 对氧磷酶 每分钟转速 SMC smooth muscle cell 平滑肌细胞 s.c. psubcutaneously 皮下注射 Tris trishydroxymethyl-aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 TC total cholesterol 总胆固醇 TG triglyceride 甘油三酯 中 文 摘 要 敌百虫加速大鼠动脉粥样硬化模型的建立及染料木素干预 研 究 生：赵绿英 指导教师：黄红林 教授 （湖南衡阳南华大学药物药理研究所，湖南 衡阳 421001） 目的：利用高脂饮食和低剂量、低毒性有机磷农药敌百虫腹腔注射建立 SD 大鼠动脉 粥样硬化模型，观察染料木素抗大鼠动脉粥样硬化作用，并检测血脂、丙二醛含量等生 化指标，初步探讨其作用机制，为染料木素的合理用药提供实验和理论依据。 方法: 健康 SD 大鼠 56 只 分 为 七 组 ， 其 中 普 通 饲 料 喂 养 （ 普 食 ） 即 溶 媒 对 照 组 (1 ml?kg-1?day-1)、高剂量染料木素(genistein ，Gen)对照组(5mg?kg-1?day-1)和阳性药物辛伐 他汀对照组(5mg?kg-1?day-1)三组，高胆固醇高脂饲料喂养（简称高脂）加敌百虫即模型 对照组[10%的二甲亚砜（DMSO），1ml?kg-1?day-1]、低剂量 Gen 对照组(0.5mg?kg-1?day-1)、 高剂量 Gen 对照组(5mg?kg-1?day-1)和阳性药辛伐他汀对照组(5 mg?kg-1?day-1)四组。 2 周为大鼠称一次体重，根据体重调整给药剂量。给药后继续按原饲料方案喂养 8 周。在实验给药前和给药后第 4、8 周分别断尾采血，使用怡成全血葡萄糖测定仪检测 大鼠血糖(Glu)，用德国罗氏诊断有限公司试剂盒检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三 酯(TG)、高密度脂蛋胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C 反应蛋白(CRP) 含量；实验第 4、8 周末用分光光度法检测血清对氧磷酶(PON1)活性 ，用 Griess 试剂 显色法测定大鼠血清总一氧化氮(NO)，硫代巴比妥法检测大鼠血清中丙二醛(MDA)浓 度 ； 第 8 周 末 处 死所 有 动 物 ， 采用 羟 肟酸 铁 比 色 法 测 定 大 鼠全 血 乙 酰 胆 碱 酯 酶 (Acetylcholine esterase, AchE)活性，摘取大鼠肝脏及主动脉弓，肉眼和苏木素-伊红(HE) 染色后观察各组大鼠主动脉弓及肝脏病理形态学变化；同时摘取心脏分离其周围组织后 称重，计算其脏器指数。使用免疫组化 SP 法检测主动脉血管壁内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)的蛋白表达情况。 结果： 1 实验大鼠一般状况 普食组大鼠毛色光泽，活动自如，活泼，体重增长较快；高脂喂养加敌百虫的四组 大鼠随着实验进程，毛色松散暗淡，活动减少，其中给予低、高剂量 Gen 和辛伐他汀 的三组大鼠精神状态明显好转，体重都呈现先降低在增长，且实验期间体重变化不大。 2 血脂含量变化 第 4、8 周末，普食喂养的三组中大鼠血清血脂含量、HDL-C/TC 与 AI 值均无显 著差异（P0.05）；高脂喂养加敌百虫的四组大鼠血清 TC、LDL-C、HDL-C 含量与 AI 值均较普食喂养的三组明显升高(P0.05 或 P0.01 或 P0.001)，而 HDL-C/TC 值明 显降低（P0.05 或 P0.01）。各组大鼠血清 TG 含量无显著差异（P0.05）。 Gen 能明显降低 TC、LDL-C，使 AI 降低，HDL-C/TC 比值升高。 3 大鼠 GLU 含量变化 Gen 各剂量组和辛伐他汀均能明显降低动脉粥样硬化大鼠血糖水平（P 0.05 或 P0.001)。 4 血清CRP含量变化 高剂量 Gen 和辛伐他汀能明显降低动脉粥样硬化大鼠血清炎症因子 CRP 的含量 （P0.05）。 5 血清 MDA 含量变化 高剂量 Gen 和辛伐他汀能明显降低血清 MDA 水平。 6 血清 NO 含量变化 高脂喂养加敌百虫的四组大鼠血清 NO 含量较普食喂养的三组明显升高（P0.05 或 P0.01）；高脂喂养加敌百虫的四组大鼠中，给予 Gen 和辛伐他汀组与高脂喂养加敌 百虫模型对照组大鼠血清 NO 含量均无显著差异（P0.05）。 7 血清 PON1 含量变化 Gen 提高 As 大鼠血清 PON1 活性(P0.05 或 P0.01)，存