股骨头骨坏死骨小梁骨微观结构、力学特性以及成、破骨活性的区域性分布特征-外科学(骨科)专业论文.docx

万方数据 万方数据 解放军医学院硕士学位论文 HYPERLINK \l _bookmark0 实验二 免疫组化染色评价人股骨头骨坏死标本成骨、破骨细胞活性 41 HYPERLINK \l _bookmark1 1．前言 41 HYPERLINK \l _bookmark2 2．材料与方法 41 HYPERLINK \l _bookmark3 3．结果 43 HYPERLINK \l _bookmark4 4、讨论 44 HYPERLINK \l _bookmark5 5、小结 44 HYPERLINK \l _bookmark6 实验三 Q-Real Time-PCR 以及 Western Blot 评价人股骨头骨坏死标本成骨、破骨细 HYPERLINK \l _bookmark6 胞活性 45 HYPERLINK \l _bookmark7 1．前言 45 HYPERLINK \l _bookmark8 2．材料与方法 45 HYPERLINK \l _bookmark9 3．结果 51 HYPERLINK \l _bookmark10 4、讨论 54 HYPERLINK \l _bookmark11 5、小结 55 HYPERLINK \l _bookmark12 文献综述：股骨头骨坏死的保头治疗 63 HYPERLINK \l _bookmark13 参考文献： 69 HYPERLINK \l _bookmark14 中英文略缩词表 74 HYPERLINK \l _bookmark15 攻读学位期间发表文章情况 75 HYPERLINK \l _bookmark16 致 谢 77 解放军医学院硕士学位论文 解放军医学院硕士学位论文 作 者：王程 学科专业：外科学（骨科） 导 师：卢世璧 题目：股骨头骨坏死骨小梁骨微观结构、力学特性以及成、 破骨活性的区域性分布特征 中文摘要 一、目的： 对人股骨头坏死标本中不同区域内骨微观结构、微观力学及成、破骨细 胞活性特征进行研究，探讨股骨头骨坏死的塌陷原因及可能的应对启示。 二、方法： 收集 2011 年 3 月至 2013 年 5 月行全髋关节置换的非创伤性股骨头坏死 患者术后的股骨头标本 10 例（Ficat Ⅳ期）。Micro-CT 扫描后，根据骨质密度 的不同，将每个标本分为软骨下骨区、坏死区、硬化区、健康区，通过病理 学检测、纳米压痕测试、实时荧光定量 PCR、Western Blot、免疫组化染色、 Trap 染色、ALP 染色等方法对不同区域的骨微观结构、微观力学性能及成骨、 破骨细胞活性进行观察和比较。 三、结果： Micro-CT 结果显示，股骨头坏死标本软骨下骨区及坏死区的骨小梁连续 性破坏；硬化区的骨小梁数目增多，间隙变窄；正常区域骨小梁结构完整， 厚度分布均匀。骨计量学结果显示，软骨下骨区及坏死区骨小梁的 BMD、 BV/TV、Tb.N、Tb.Th 均低于健康区，而 Tb.Sp 高于健康区，差异具有统计学 意义（P 0.05）。硬化区骨小梁的 BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th 均高于健康 区，而 Tb.Sp 低于健康区，差异具有统计学意义（P 0.05）。软骨下骨区、 坏死区、硬化区和健康区骨小梁的弹性模量分别为（ 13.808±4.22）GPa、 （13.999±3.816）GPa、（17.266±3.533）GPa 和（11.927±1.743）GPa；硬度 分别为（0.425±0.173）GPa 、（0.331±0.173）GPa、（0.661±0.208）GPa 和 1 （0.423±0.088）GPa。抗酒石酸酸性磷酸酶（Trap）染色结果显示，软骨下骨 区和坏死区可见 Trap 染色阳性细胞，硬化区及健康区未见 Trap 染色阳性细胞。 碱性磷酸酶（ALP）染色结果显示，硬化区及健康区可见 ALP 染色阳性细胞， 软骨下骨区和坏死区未见 ALP 染色阳性细胞。免疫组化染色结果显示，骨形 成相关因子 Runx2、BMP2、BMP7、OPG 在硬化区及健康区表达高于其他区 域；骨吸收相关因子 RANK 和 RANKL 在软骨下骨区及坏死区表达高于其他 区域。RT-PCR 的结果显示，骨形成相关基因 Runx2 和 BMP2 在硬化区及健 康区表达高于其他区域；骨吸收相关基因 RANK 和 RANKL 在软骨下骨区及 坏死区表达高于其他区域。Werstern Blot 的结果显示，骨形成相关蛋白 Runx2、 BMP2、BMP7、OPG 在硬化区及健康区的表达量高于其他区域。