副血链球菌粘附素Fap1糖基化相关基因-nss的功能研究-植物病理学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 第 第 1 章 前言 IV IV PAGE PAGE 11 mature Fap1-specific antibody F51. However its complementary strain could restore Fap1 glycosylation of wild type and react with E42, F51 and D10 antibody. Fap1?RII modified by Gtf1 and Gtf2 migrated slower only in the presence of Nss. By contrast, the migration rate didn’t change when co-expressed with other potential glycosyltransferases. Recombinant Fap1?RII glycosylated by Gtf1, Gtf2 and Nss exhibited two glycosyl peaks, GlcNAc and Glucose, whereas recombinant Fap1?RII protein modified by Gtf1 and Gtf2 only possesses a GlcNAc peak. Conclusions: Nss is involved in Fap1 glycosylation and mediate the second step of Fap1 glycosylation. Nss is a glucosetransferase. KEY WORDS: Fap1, adhesion, glycosylation, Streptococcus parasanguis FW213 Dissertation Type: Basic research 第1章 前言 1.1 口腔链球菌 口腔疾病一般有三种常见的细菌感染表现形式：牙周炎，牙龈炎和龋齿。牙 龈炎若不及时治疗，则可发展为牙周病。这种疾病的成因多是由于不注意口腔卫 生造成的。牙周炎是指波及深层牙周组织（牙周膜、牙槽骨、牙骨质）的炎症。 牙周炎的早期症状不易引起重视，造成牙周组织长期慢性感染，炎症反复发作， 不仅损害口腔咀嚼系统的功能，还会严重影响全身健康。龋齿是牙齿硬组织逐渐 被破坏的一种疾病，发病开始在牙冠，如不及时治疗，病变继续发展，形成龋 洞，终至牙冠完全破坏消失。龋齿的继发感染可致成或加得关节炎、心内膜炎和 多种眼病等全身其他疾病。 在这三种常见口腔疾病发病中起主导作用的细菌当属口腔链球菌。口腔链球 菌是一种低 G+C 组成的革兰氏阳性兼性厌氧菌。因其在含血琼脂培养基上呈现 草绿色的不完全溶血，又名草绿色链球菌。喜在含 5%CO2 及 37℃的环境下生 长，由于对于营养的要求较高，故多以 Todd-Hewit 培养基来培养。在分类学 上，根据染色体的相似程度和 16S RNA 序列细分为 mitis group、anginosus Group、 mutans group、bovis group 和 salivarious group 等五大类[1]。 1.2 粘附素及生物膜的形成 细菌造成感染的能力取决于对寄主的定植能力。定植过程中的第一步就是将 有机质粘附到寄主组织上。一些原本具有毒力的菌株在丧失粘附能力后就会失去 它们的毒性，因此探明细菌粘附的机制对于疾病控制有着非常重要的作用[2]。口 腔链球菌主要寄生在人类牙齿的表面，它们在牙齿表面快速聚集并为其他口腔细 菌提供粘附的基质，如果基质不能被及时清除，就会形成牙菌斑[3]。口腔医学家 认为牙菌斑也是一种生物膜,称为牙生物膜或牙菌斑生物膜[4]。牙菌斑是造成蛀 牙及牙周病的起因之一。当牙菌斑藉由口腔中的伤口进入血流，可随循环至心脏 并可附着在瓣膜上，造成心内膜炎。 粘附素是细菌细胞表面的蛋白质，为致病菌的重要毒素分子之一，与细菌生 物膜引起的细菌致病性密切相关。细菌生物膜是指附着于有生命或无生命物体表 面被细菌胞外大分子包裹的有组织的细菌群体。细菌生物膜的形成是一个动态过 程，包括细菌起始粘附、生物膜发展和成熟等阶段。细菌对宿主表面的粘附是细 河南科技大学硕士学位论文 河南科技大学硕士学位论文 第 第 1 章 前言 PAGE PAGE 10 PAGE PAGE 3 菌在宿主体内形成生物膜的第一步[5,6]，这种粘附作用主要是细菌表面特定的粘 附素蛋白识别宿主表面受体的结果[7,8]。多糖在牙菌斑生物膜形成过程中也起着 不可或缺的作用。用四种致龋菌 Streptococcus sobrinus, Streptococcus mutan