当归-川芎药对治疗小鼠原发性痛经模型的实验研究-中医妇科学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要I HYPERLINK \l _bookmark0 AbstractⅤ HYPERLINK \l _bookmark1 缩略词表Ⅺ 前 言1 实验研究4 1 实验材料4 1.1 实验动物4 1.2 药物4 1.3 主要试剂4 1.4 主要仪器5 2 实验方法 6 2.1 实验动物分组6 2.2 实验动物称重 6 2.3 原发性痛经模型的建立及给药 6 2.4 取材6 2.5 观察指标及方法 7 结 果12 1 各组扭体潜伏期及扭体次数观察 12 2 OTR 表达 12 Western-blot 检测 OTR 蛋白表达 12 Real Time PCR 检测 OTR mRNA 的表达 13 3 ELISA 法检测子宫组织匀浆中 PGF2α、PGE2、OT、E2、P、AVP 的水平 13 讨 论20 1 中医对原发性痛经的认识 20 1.1 古代医学对原发性痛经病因病机的认识 20 1.2 现代中医对原发性痛经病因病机的研究 21 2 西医对原发性痛经的认识 22 2.1 内分泌因素 22 2.2 其他肽类及自主神经系统 24 2.3 子宫因素 25 2.4 心理因素 25 2.5 其他因素 26 3 立法与处方依据 26 4 动物模型的选择 29 5 指标的选择 30 6 当归-川芎药对对模型小鼠扭体的抑制作用 33 7 当归-川芎药对对模型小鼠生化指标的影响 33 8 本研究存在的不足及展望 33 8.1 本研究不足之处 33 8.2 本研究展望34 结 论35 参考文献36 附 录 41 致 谢54 中文摘要 目的： 原发性痛经（Primary Dysmenorrhea，PD）是妇科最常见的疾病之一， 临床以周期性下腹部疼痛、坠胀为主症，严重影响患者的学习、工作和生 活。已知前列腺素（prostaglandin，PG）与妇科疼痛的关系密切，近年 的研究发现，在 PD 的发病机制中，PGF2α含量变化是至关重要的一环，而 催产素（OT）、催产素受体（OTR）、雌二醇（E2）、孕酮（P）、血管加 压素（AVP）等因子亦可通过调控 PGF2α含量变化而发挥重要作用。本研究 通过建立原发性痛经动物模型，分析 PGF2α、PGE2、OT、OTR、E2、P、AVP 等因子在实验小鼠子宫组织中的表达，以探讨原发性痛经疼痛发生的机 制；并对实验小鼠采用当归-川芎药对进行治疗，探讨抑制 PGF2α含量升高 的最佳配伍及当归-川芎对原发性痛经起作用的机制。 方法： 选用健康雌性小鼠 70 只，昆明种，SPF 级，重约(18~22) g，按当归、 川芎的配伍比例不同而随机分组：药物 1：1 组(3.03g/kg)、药物 2：1 组(2.28g/kg)、药物 3：1 组(2.02g/kg)、药物 3：2 组(2.58g/kg)、益母 草膏组（0.60g/kg)、模型组、空白对照组。 采用补佳乐(0.5mg/kg)联合催产素(2IU/只)建立原发性痛经模型，连 续给药 12 天。具体方案如下：药物组：上午灌胃对应药物 20ml·kg-1·d-1， 下午灌胃补佳乐；益母草膏组：上午灌胃益母草膏 20ml·kg-1·d-1，下午 灌胃补佳乐；模型组：上午灌胃生理盐水 20ml·kg-1·d-1，下午灌胃补佳 乐；空白对照组：灌胃生理盐水 20ml·kg-1·d-1，每天两次。第 12 天末 次灌胃补佳乐后 1 小时再腹腔注射催产素 2IU/只(0.2ml)，诱发扭体反应， 空白对照组小鼠腹腔注射生理盐水 0.2ml/只。观察腹腔注射催产素后 30 分钟内各组小鼠的扭体潜伏期及扭体次数。行为学指标观测完毕后，处死 动物。剥离小鼠子宫，部分组织立即置于液氮中后转入-80℃冰箱用于 Real Time PCR 检测、Western-blot 检测，另一部分组织匀浆取上清液用 I 于 ELISA 法检测。 结果： 1 扭体反应 除空白对照组外，各组小鼠均产生扭体反应，扭体发生率为100%。与 模型组比较，药物1：1组、药物2：1组、药物3：1组、药物3：2组、益母 草膏组小鼠扭体潜伏期明显延长，差异有极显著统计学意义（P 0.01）； 扭体次数显著减少，差异亦有统计学意义(药物2：1组为P 0.01，其余 组均为P 0.05 )。各治疗组之间差异没有统计学意义(P 0.05) 。 OTR 表达 Western-blot 检测 OTR 蛋白表达 与空白对照组比较，模型组及各给药组小鼠子宫内OTR蛋白表达增加， 差异有统计学意义（模型组：P 0.01，而药物1：1组、药物2：1组、药 物3：1组、药物3：2组、益母草膏组：P 0.05）。与模型组比较，药物 1：1组、药物2：1组、药物3：