粪肠球菌溶血素在大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎中的作用-口腔临床医学专业论文.docxVIP

福建医科大学硕士研究生毕业论文 福建医科大学硕士研究生毕业论文 粪肠球菌溶血素在大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎中的作用 PAGE PAGE 2 英文缩略词索引 英文缩写 英文全称 中文全称 Cyl Cytolysin 溶血素 ATCC America Type Culture Collection 美国标准菌种收藏所 HE Hematoxylin-Eosin 苏木精-伊红 PMNs Polymorphonuclear Neutrophils 多形核中性粒细胞 TNF-α Tumor Necrosis Factor-α 肿瘤坏死因子 α IL-1β Interleukin-1β 白细胞介素 1β MMP-8 Matrix Metalloproteinases-8 基质金属胶原蛋白酶 8 TNFR Tumor Necrosis Factor Receptor 肿瘤坏死因子受体 M-CSF Macrophage Colony Stimulating Factor 巨噬细胞集落刺激因 子 RANK Nuclear Factor κB Receptor Activation Factor 核因子 κB 受体活化 因子 RANKL Nuclear Factor κB Receptor Activation Factor Ligands 核因子 κB 受体活化 因子配体 OPG Osteoprotegerin 骨保护素 MMPs Matrix Metalloproteinases 基质金属胶原蛋白酶 ECM Extracellular Matrix 细胞外基质 SD BHI EDTA NaOCl Sprague Dawley Brain Heart Infusion Ethylene Diamine Tetraacetic Acid Sodium Hypochlorite SD 大鼠 脑心浸液 乙二胺四乙酸 次氯酸钠 FC PBS D CFU Formocresol Phosphate Buffered Saline Density Colony Forming Unit 甲醛甲酚液 磷酸盐缓冲液 密度 菌落形成单位 OD Optical Density 光密度 IOD Integral Optical Density 积分光密度 粪肠球菌溶血素在大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎中的作用 研究生：卢冰铃 导 师：黄晓晶 教授 中文摘要 根尖周炎是一种口腔常见疾病，目前根管治疗术是治疗根尖周炎的首选有效 方法。然而即使经过完善的根管治疗，却仍然有失败的病例，通常表现为根尖区 进行性溶骨破坏和复发性根尖周脓肿，最终形成难治性根尖周炎。研究发现，导 致这些现象的主要原因是根管内细菌的持续性感染。近年来发现在根管治疗失败 病例中粪肠球菌具有高检出率。 粪肠球菌拥有多种毒力因子，它们的表达可根据周围环境因素的改变而进行 调节，这是粪肠球菌能够在治疗后根管内存活并致病的关键。溶血素（cytolysin, Cyl）是粪肠球菌主要的毒力因子之一，虽然已证实它对其他粪肠球菌临床感染 疾病如心内膜炎、眼内炎等有很强的促炎作用，但是目前很少有关于其在难治性 根尖周炎发病机理方面的报道。 溶血素基因cyl的表达受周围环境影响较大，且影响其表达的因素众多，已 有报道当周围氧浓度下降、血细胞存在、周围细胞密度增加时均能上调它的表达 水平。治疗后根管内氧浓度下降；主要营养物质以根尖周组织提供的血清为主； 细菌细胞密度大大降低。据此推测，粪肠球菌进入根管后cyl可能受到这些因素 的影响，进行表达的调节，从而影响粪肠球菌在治疗后根管内的存活和致病。 基于此，本研究在髓腔开放建立混合菌初次感染大鼠慢性根尖周炎模型的基 础上分别导入含有cyl基因的溶血型以及不含有cyl基因的非溶血型粪肠球菌标准 菌株，从而构建溶血型及非溶血型粪肠球菌再感染大鼠根尖周炎模型，定期行组 织病理学分析及各细胞因子表达量的检测，比较溶血型与非溶血型粪肠球菌再感 染大鼠根尖周炎的病程进展及炎症反应的差异，并结合溶血型粪肠球菌cyl基因 在体外及体内各不同阶段表达量变化的检测结果，探索粪肠球菌Cyl在其再感染 根尖周炎中的作用。本研究包括三部分实验： 第一部分：溶血素对大鼠粪肠球菌再感染根尖周炎模型炎症进展影响的组织病 理学分析 方法：SD 大鼠 84 只，双侧上颌第一磨牙开髓后建立混合菌（不含粪肠球菌） 初次感染慢性根尖周炎模型后将大鼠分为四组：消毒组 6 只（根管预备、消毒后 封 FC 棉球并继续正常饲养 2 周后取样检测）；慢性根尖周炎组 6 只（继续正常 饲养动物 8 周后取样检测）；溶血型粪肠球菌再感染根尖周炎组 36 只、非溶血型 粪肠球菌再感染根尖周炎组 36 只（经根管预