敌百虫加速兔食饵性动脉粥样硬化作用的实验研究-药理学专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 中 文 摘 要 敌百虫加速兔食饵性动脉粥样硬化作用的实验研究 研 究 生：李荣霏 指导教师：黄红林 教授 （湖南衡阳南华大学药物药理研究所，湖南 衡阳 421001） 目的：观测敌百虫(Dipterex)加速高脂模型兔动脉粥样硬化形成的作用并初步探讨 其作用机制。 方法： （1）动物实验：健康新西兰兔 40 只，普通饲料适应性喂养 2 周后随机分为 2 组， ①高胆固醇高脂（HCHL）组：单纯喂饲 HCHL 饲料（普通草粉饲料加入 1%胆固醇， 5%猪油）；②高胆固醇高脂加 Dipterex（HCHL+D）组：喂饲 HCHL 饲料加 Dipterex 清晨空腹灌胃（18mg·kg-1·d-1）。在喂饲 HCHL 饲料前和实验第 5、10、15 周分别 于耳缘静脉采血，检测兔血清对氧磷酶（PON1）、胆碱酯酶（ChE）、血清总胆固醇 （TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、C 反应蛋 白（CRP）和血糖（Glu）；实验前，第 5 周、第 10 周每组分别处死 5 只兔，第 15 周处死全部剩余兔，取主动脉全段，苏丹Ⅳ染色，1mm2 透明方格纸法测定粥样斑块 面积占内膜面积的百分比；检测肝 PON1 活性及血管内皮依赖性舒张功能。 （2）细胞实验：将人脐静脉内皮细胞（HUVEC-12）与含不同浓度 Dipterex 的 DMEM 培养基培养 24 h 后，MTT 比色法检测细胞的活性并计算 Dipterex 抑制 HUVEC-12 的 IC50；以 IC50 的 Dipterex 处理细胞不同时间后（0 h，4 h，6 h，8 h，12 h，24 h， 48 h），观察 Dipterex 诱导 HUVEC-12 损伤的时量关系；Wesern Blot 法测定内皮型一 氧化氮合酶（eNOS）的蛋白表达；硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛（MDA） 浓度。 结果： （1）喂饲 HCHL 后，二组动物的 TC、TG、HDL、LDL、CRP、Glu 水平均明显增 高，二组检测值差异无显著意义（p0.05）；血清 PON1、肝 PON1 活性降低，HCHL+D 组 PON1 活性低于 HCHL 组（p0.05）；二组动物主动脉 EDRR 均降低，HCHL+D 组 EDRR 降低大于 HCHL 组（p0.05）；二组动物主动脉均见粥样硬化斑块形成，但 HCHL+D 组动脉粥样斑块面积/内膜面积百分比明显高于 HCHL 组（p 0.05）。 （2）经不同浓度 Dipterex（0 μmol/L、12.5 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、 200 μmol/L、400 μmol/L、800 μmol/L）处理 HUVEC-12 24 h 后，MTT 测定结果显示： 随着加入 Dipterex 浓度的增加，细胞活性明显下降，IC50 约为 410 μmol/L。以 410 μmol/L Dipterex 处理细胞不同时间（0 h，4 h，6 h，8 h，12 h，24 h，48 h），随着 Dipterex 作用时间的延长，对细胞的抑制作用呈时间依赖性增加，同时促进内皮细胞 上清液 MDA 的产生；抑制 eNOS 的表达。 结论: 高脂模型动物长期口服低剂量 Dipterex，消耗机体 PON1，降低血管内皮依 赖性舒张功能；Dipterex 与内皮细胞孵育，通过氧化应激抑制 eNOS 的表达，诱导 HUVEC-12 损伤，加速动脉粥样硬化形成。 关键词：敌百虫；动脉粥样硬化；对氧磷酶；兔；内皮细胞；内皮型一氧化氮合 酶 The Effect of Dipterex Accelerates Atherosclerosis in Rabbits by Hyperlipidemic Diet Abstract Objective: To study the effects of Dipterex accelerating atherosclerosis in rabbits by hyperlidemic diet so as to explore the possible mechanism Methods: Experiments on rabbits:Frouty New-Zealand rabbits were randomly divided into two experimental groups after being fed with normal diet for 2 weeks, Group HCHL were fed with hypercholesterolemic diet,and Group HCHL+D we