复方甘草甜素脂质体对人肝星状细胞增殖的影响-内科学专业论文.docxVIP

汕头大学医学院 2005 汕头大学医学院 2005 级硕士研究生学位论文 韦始亮 PAGE PAGE III 复方甘草甜素脂质体对人肝星状细胞增殖的影响 中文摘要 目的 探讨复方甘草甜素脂质体对体外培养人肝星状细胞（ hepatic stellate cell，HSC）增殖的影响，以探讨抗肝纤维化新药物剂型。 方法 1 .用超声薄膜法制备复方甘草甜素脂质体。 2.体外培养人 HSC 株，在对数生长期细胞培养液中分别加入药物如 下：1)单纯 HSC 对照组；2)单纯脂质体对照组；3)复方甘草甜素对照组 0.03125、 0.0625、0.125 和 0.25mg/ml；4）复方甘草甜素脂质体 0.03125、0.0625、0.125 和 0.25mg/ml，共同培养 24h 后，应用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖率。 3.Giemsa 染色后显微镜下观察细胞形态学变化并使用计算机图文 分析系统细胞测量程序计算各组细胞占每个视野中的面积百分比（C%）。 结果 1.MTT 法显示，不同浓度的复方甘草甜素及其脂质体作用 HSC24 h， HSC 增殖的抑制率均明显高于单纯脂质体组和单纯 HSC 对照组，相同浓度的复方 甘草甜素脂质体组 HSC 增殖的抑制率亦高于复方甘草甜素对照组，差异有统计学 意义（P0.05）；而单纯 HSC 对照组和单纯脂质体组 HSC 增殖的抑制率则无明显 差别（P0.05）；在一定浓度范围内（0.0625mg/ml～0.25mg/ml），增殖的抑制率 的递增呈浓度依赖性； 2. Giemsa 染色后显微镜下发现实验组细胞数随药物浓度增大而 减少，细胞变形，相同浓度的复方甘草甜素脂质体组细胞数较复方甘草甜素组少， 而单纯 HSC 对照组与单纯脂质体组则无明显差别；计算机图文分析系统细胞测量 程序计算各组细胞占每个视野的面积百分比后发现符合以上规律。 结论 单纯脂质体对体外培养的 HSC 增殖无明显影响，复方甘草甜素及其 脂质体均可抑制体外活化的 HSC 的增殖，相同浓度的复方甘草甜素脂质体较复方 甘草甜素对 HSC 增殖的抑制作用明显增强。 关键词： 肝纤维化；复方甘草甜素脂质体；肝星状细胞；抑制；增殖 The effects of SNMC-liposome on proliferation of human hepatic stellate cells Master candidate Wei Shiliang1 Advisor Professor Ye Hongjun2 (1.Shantou University medical college Dept. of digestive of Peijing University Shenzhen hospital) Abstract Objective To evaluate the effects of StrongerNeo－MinophagenC(SNMC) -liposome on the proliferation of human hepatic stellate cells, and explore a new kind of pharmaceutical dosage form on the treatment of hepatic fibrosis. Methods 1.SNMC-liposome was made by ultrasound microfilm method. HSCs were incubated in medium when they during the exponential phase of growth with different concentrations of SNMC and SNMC-liposome(0.03125 、 0.0625 mg/ml 、 0.125 mg/ml and 0.25mg/ml respectively) or without SNMC and SNMC-liposome for 24 hours. The proliferative inhibition rate of the HSCs was determined by MTT assay. The conformation of HSCs was observed by microscopy after Giemsa staining. High resolution pathological image analysis system was used to determine the areas of cells in every visual field under micro