低频rTMS对免疫介导的MND豚鼠的治疗作用及其机制研究-神经病学专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 1 PAGE 1 低频 rTMS 对免疫介导的 MND 豚鼠的治疗作用及 其机制研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科 硕士研究生： 戚鹏 指导老师： 梅元武 教授 中文摘要 第一部分：低频 rTMS 对免疫介导的 MND 豚鼠生存时间 和运动功能的影响 目的: 观察低频重复经颅磁刺激（rTMS）对免疫介导的运动神经元病（MND） 豚鼠生存时间和运动功能的影响，探讨低频 rTMS 对肌萎缩侧索硬化症（ALS） 的治疗作用。 方法：新鲜的牛脊髓前角匀浆免疫豚鼠建立实验性自身免疫灰质病（EAGMD） 模型。将发病高峰期（第 2 次免疫后 2-4 周）豚鼠随机分为治疗组和假治疗组。 治疗组豚鼠给予 1Hz rTMS 治疗 2 周（每周连续 5 天），假治疗组豚鼠给予假治 疗 2 周(每周连续 5 天)，分别于治疗前、后利用斜板试验评价其运动功能。同时 观察并比较两组动物的生存时间。 结果：治疗组中部分个体治疗后第 2 天斜板度数较治疗前有好转，但未达到统计 学意义（P＞0.05），治疗结束后第 9 天测量斜板度数继续下降（P＜0.05）。治疗 后治疗组斜板度数优于假治疗组（P＜0.05），但两组之间的生存时间无统计学差 异（P＞0.05）。 结论：低频 rTMS 治疗可以延缓 EAGMD 豚鼠运动功能的恶化，但对其生存时间 未显示出明显的延长作用。低频 rTMS 对 ALS 具有一定的治疗作用。 关键词：运动神经元病； 肌萎缩侧索硬化症； 重复经颅磁刺激； 运动功能； 生存时间 第二部分：低频 rTMS 对免疫介导的 MND 豚鼠 Glu 能和 GABA 能神经元的影响 目的：研究低频 rTMS 对免疫介导的 MND 模型豚鼠病变部位的谷氨酸（glutamic acid, Glu）能和 γ 氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid, GABA）能神经元的影响， 初步探讨低频 rTMS 的作用机制，为低频 rTMS 治疗 ALS 提供理论依据。 方法：新鲜的牛脊髓前角匀浆免疫豚鼠建立 EAGMD 模型。发病早期治疗组给 予 1Hz rTMS 治疗 2 周(每周连续 5 天)，治疗前、后应用斜板试验评价动物的运 动功能。治疗后利用免疫组化方法光镜下分别比较治疗组、假治疗组和对照组三 组豚鼠之间的大脑皮层、颈膨大和腰膨大等部位 Glu 能和 GABA 能神经元的数 目和平均光密度值的差别。 结果：治疗组经过 2 周 1Hz rTMS 治疗后大脑皮层、颈膨大和腰膨大 Glu 能神经 元数目较假治疗组少，平均光密度值较假治疗组低，但较对照组恰相反。治疗组 GABA 能神经元结果与 Glu 能神经元相反。 结论：兴奋性氨基酸的毒性参与免疫介导的运动神经元损伤过程。低频 rTMS 具 有抑制 Glu 能神经元和增强 GABA 能神经元的作用，通过对兴奋性和抑制性神 经元作用的调整，从而对 ALS 起到治疗作用。 关键词：重复经颅磁刺激；运动神经元病；肌萎缩侧索硬化症；谷氨酸；γ 氨基 丁酸 第三部分：低频 rTMS 对免疫介导的 MND 豚鼠线粒体的 保护作用 目的：探讨低频 rTMS 对免疫介导的 MND 豚鼠病变部位线粒体的作用及其机制， 为低频 rTMS 治疗 ALS 提供理论依据。 方法：新鲜的牛脊髓前角匀浆免疫豚鼠建立 EAGMD 模型。发病早期治疗组给 予 1Hz rTMS 治疗 2 周后处死，透射电镜观察治疗组、假治疗组和对照组之间的 形态学改变。利用差速离心法分别提取大脑皮层和脊髓颈、腰膨大处线粒体后制 成匀浆。分析并比较三组之间相应部位线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性。 结果：电镜显示免疫介导的 MND 豚鼠病变部位线粒体可发生肿胀、线粒体嵴模 糊不清或呈空泡样改变等形态学变化，这些改变在假治疗组更常见到。治疗后， 治疗组线粒体 SDH 活性与假治疗组和对照组之间均有显著性差异(P＜0.05）。 结论：线粒体障碍参与 EAGMD 的损伤过程，除形态学变化外，线粒体 SDH 活 性下降。低频 rTMS 可以增强线粒体 SDH 活性，对线粒体起到一定的保护作用， 这可能是低频 rTMS 治疗 ALS 有效的另一机制。 关键词：重复经颅磁刺激；运动神经元病；肌萎缩侧索硬化症；线粒体；琥珀酸 脱氢酶 华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 Therapeutic effects and mechanisms of low frequency repetitive transcranial magnetic stimulation on guinea pigs with immune-med