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应用分类 1、膜表面抗原和胞浆内蛋白分析 2、DNA含量及细胞周期分析 3、定量分析 4、细胞功能分析 5、凋亡研究 6、细胞间相互左右 7、细胞分选 1.检测淋巴细胞亚群，监测细胞免疫状态 2.白血病/淋巴瘤免疫分型 3.HLA组织配型及HLA与某些疾病的关系 4.干祖细胞的定量及成分分析. 5.其它:粘附分子;TCR多态性检测;肿瘤癌基因及 抑癌基因蛋白产物的检测;细胞内酶;耐药蛋 白的分析等等。 临床应用 疾病诊断:为疾病诊断提供直接的或支持诊断的依据 免疫调节：细胞因子/受体的相互作用 共刺激分子受体/配体的相互作用 发病机理：肿瘤的发病与机体的免疫力低下、以及信号传递 障碍有关 药物/疫苗效果的评价：肿瘤生物治疗的时机选择、以及效果 的监测 免疫状态评价： 移植、放化疗等. 细胞周期分析:在细胞周期(G0，G1，S，G2 ，M)的各个时期，DNA的含量随各时相呈现出周期性的变化。通过核酸染料标记DNA，并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%，S%及G2/M%。了解细胞的周期分布及细胞的增殖活性。也可利用细胞周期蛋白（CYCLIN）、Ki67、核增殖抗原（PCNA）等，对细胞周期进行精确的分期：G0、G1、S、G2、M. DNA含量及细胞周期分析 G2 M G0 G1 s 0 200 400 600 800 1000 G0 G1 s G2 M DNA Analysis DNA content Count 2N 4N Normal Cell Cycle 1. 肿瘤的早期诊断。 2. 肿瘤的良恶性判断。 3. 观察细胞的增殖状态及周期分布。 4. 疗效监测 细胞功能分析 1.吞噬功能试验 2.氧爆发试验 3.根据T淋巴细胞分泌细胞因子的不同将CD4+或 CD8+分为介导细胞免疫的I型细胞和介导体液 免疫的II型细胞. 4.药物泵的功能检测 5.NK细胞的肿瘤杀伤活性检测 6.血小板的粘附,聚集功能检测 树突状细胞分析（Dendritic Cells,DC) DC是主要的抗原递呈细胞，同时又是重要的先天免疫细胞，还是具有免疫调控功能的一个细胞群，没有发现特异性的抗原标记 DC研究的主要内容包括直接分析计数、体外诱导检测,一般分为两群－PDC,MDC 当前DC检测的方法： 1）Lin-,CD11c,CD123,同时可能表达CD80,CD86,CD83,DR等 2）利用BDCA1,2,3,4对外周血或其它组织DC进行分析 3）CD14+16/CD85/CD33,CD14+16/CD85/CD123 T细胞分析 相对计数－淋巴细胞亚群数量检查项目和意义 疾病 CD3 CD4 CD8 CD4/CD8 NK 自身免疫病 降低 增高 降低 降低 AIDS 降低 严重降低 增高 降低 SARS 降低 降低 降低 降低 降低 慢性活动性肝炎、肝硬化 降低 正常或 增高 降低 降低 肿瘤 降低 降低 增高 降低 降低 CD4细胞绝对计数 对AIDS病人的诊断、疗效和预后有重要的指导意义，一般认为CUTOFF值为200/ul. 绝对计数是加入浓度已知的标准微球与标本一起测定，流式细胞仪控制软件在设置后能自动计算出浓度 对任何细胞群体都可以进行绝对计数 Th1Th2细胞因子分泌细胞测定 　　根据产生的细胞因子的类型和生物学功能,人的ＣＤ4+Ｔ细胞可以分为Ｔｈ1、Ｔｈ2 Ｔｈ1细胞产生ＩＬ 2、ＩＬ 12、ＩＦＮ γ、ＴＮＦ β等细胞因子,主要参与细胞介导的免疫反应、迟发性过敏反应,并在清除病毒等细胞内致病因子方面起着重要作用 Ｔｈ2细胞分泌ＩＬ 4、ＩＬ 5、ＩＬ 6、ＩＬ 10、ＩＬ 13等细胞因子,主要促进体液免疫反应,中和胞外病原体 相应地，CD8+T细胞也可以分为Tc1和Tc2 Th1细胞：介导细胞免疫、细胞毒性T细胞的生长和活化、巨噬细胞的活化、介导迟发型过敏反应。其功能亢进将导致炎症慢性迁延，器官特异性自身免疫病，急性排异反应和接触性皮炎等的发病和免疫病理损伤。 Th2细胞 ：介导体液免疫，促进B细胞的生长、活化和分化，是IgG1和IgE类抗体的转换因子，其功能亢进将导致特异性过敏反应，参与高IgE综合症和嗜酸性粒细胞增多症。 Th1Th2检测Tips 一定要确定T细胞是否已经活化，细胞转运阻滞是否成功，胞膜打孔是否有效 一定要用胞浆内同型对照（特别是FITC标记时），以便分别部分弱表达的细胞因子。 TETRAM