常见的基因治疗.pptVIP

INF 干扰素；TNF 肿瘤坏死因子； G-CSF 粒细胞集落刺激因子； GM-CSF 粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子 许多肿瘤细胞缺乏MHC I类或II类分子的表达，导致不能将肿瘤抗原运输到细胞表面，也不能向T细胞呈递抗原，因此无法诱导产生特异性的CTL（细胞毒性T淋巴细胞），使肿瘤细胞能够逃避机体的免疫监视。 ?化疗是指应用药物治疗癌症。这些特殊的药物可杀灭肿瘤细胞，有时称为细胞毒药物。 肿瘤细胞耐药性和化疗药物对正常细胞的损伤作用是临床上对肿瘤患者进行化疗时面临的两大难题。 ?肿瘤细胞药物增敏基因治疗 ：将外源基因插入肿瘤细胞后，改变肿瘤细胞对药物的敏感性。如将钙调素基因转入癌细胞，钙调素基因的表达产物作为细胞内信号转导系统的重要物质，明显增强了肿瘤细胞对化疗药物的吸收量而相应减少了排出量，从而提高了肿瘤细胞内化疗药物浓度，导致肿瘤细胞死亡。 HSV-tk基因编码的胸苷激酶（TK）催化丙氧鸟苷（ganciclovir, GCV）磷酸化成为磷酸化的核苷酸类似物，阻断DNA的合成； CD可将5’-氟胞嘧啶（5’-FC）转化为5’-氟尿嘧啶（5’-FU）而发挥细胞毒性作用。 ?肿瘤细胞药物增敏基因治疗 ：将外源基因插入肿瘤细胞后，改变肿瘤细胞对药物的敏感性。如将钙调素基因转入癌细胞，钙调素基因的表达产物作为细胞内信号转导系统的重要物质，明显增强了肿瘤细胞对化疗药物的吸收量而相应减少了排出量，从而提高了肿瘤细胞内化疗药物浓度，导致肿瘤细胞死亡。 TGF肿瘤生长因子 逆转录病毒是一种RNA病毒。由包膜蛋白包裹着20面体的核衣壳构成，核衣壳中有2个拷贝的正链RNA基因组。 普西 很多遗传病都与造血细胞有关，骨髓移植方法已经建立，使造血细胞成为基因治疗中最重要的靶细胞。 皮肤成纤维细胞容易移植并可经体外培养生长。 肝脏是重要的代谢器官，许多遗传病都是由于肝脏特异的基因产物缺陷而引起的，肝脏也是肿瘤的高发部位，因此，肝细胞是基因治疗研究的热点之一。 血管内皮细胞：将基因导入血管内皮细胞，可以直接向血液中分泌基因表达产物。 淋巴细胞：常用，容易从体内取出和回输，可以在体外进行培养和扩增，对目前常用的几种基因转移方法敏感度较好。 骨骼肌细胞的突出特点是可采用直接注射法进行基因导入。 肿瘤细胞始终处于旺盛的分裂状态，对基因转移敏感。 从中看出，运用病毒作为载体占了很大的比重，在以后的应用中仍有可能作为主要的基因转移系统。 脂质体介导的基因转移技术使用方便、成本低廉。其基本原理是利用阳离子脂质体单体与DNA混合后，可以自动形成包埋外源DNA的脂质体，然后与细胞一起温育，即可通过细胞内吞作用将外源DNA转移到细胞内。 作为基因转移的载体，脂质体存在转染效率较低和转染基因表达时间短暂两个缺陷。 Safety concerns have led to non-viral systems e.g. liposomes and, on the next slide, receptor mediated endocytosis. 脂质体是磷脂的亲水性基团和疏水性基团在水相中自动组装成有序的微观和宏观结构，如双层的囊泡状，这种双层膜的封闭结构能够包裹DNA分子，形成脂质体/DNA的复合物，通过细胞膜的内吞作用进入细胞。 最后大多还需要动物实验，证明转染细胞及表达的目的蛋白对动物的整体影响。 一则严重影响细胞DNA包括淋巴细胞DNA的合成代谢，同时由于三磷酸脱氧腺苷在淋巴细胞的堆积，后者对淋巴细胞尤其是T细胞具有一定的毒性作用，从而造成淋巴细胞在增补、分化及功能方面的障碍。 在我国，用腺病毒-p53治疗头颈部鳞癌已进入II期临床试验。 将细胞因子基因导入肿瘤细胞，可以使表达细胞因子的肿瘤细胞对机体免疫系统产生较强的免疫刺激作用。 效应细胞对肿瘤的杀伤受主要组织相容性复合体限制，并需要共刺激分子的协同作用。肿瘤细胞可以通过MHC和共刺激分子表达减弱或缺失逃逸免疫攻击，诱导表达或直接转染MHC和共刺激分子基因能够提高肿瘤细胞的免疫原性。 将细胞因子基因直接导入免疫细胞， 可以增强细胞介导的免疫功能。在这种情况下，基因转移的靶细胞是免疫细胞，主要是淋巴细胞，尤其是肿瘤浸润淋巴细胞（TIL），因为TIL能选择性地浸润于肿瘤部位。 树突状细胞是功能最强的抗原提呈细胞 对于感染性疾病，通过破坏病毒本身表达的调控途经或者利用特异的反义RNA或反义DNA来封闭病毒结构蛋白的mRNA,以特异抑制或阻止病毒的表达。 HIV，HBV， HPV Treatment of Hemophilia B with Autologous Skin Fibroblasts Transduced with a Human Clotting Factor IX，　 cDN