第二章 病毒体的性质必威体育精装版版病毒学精品电子课件.ppt

石炭酸：剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 SDS：剥离病毒粒子的蛋白质衣壳 使蛋白质降解为多肽 溶解病毒囊膜 吐温和去氧胆酸钠：破坏病毒的囊膜，但可保存病毒粒子原来的蛋白结构和抗原性。 NP-40：裂解病毒蛋白质 脲素、胍：破坏氢键和氨基酸残基的非极性侧链之间的疏水键，使蛋白质变性 能够减轻病毒保存过程中其他理化学因子对病毒的损伤，从而保持病毒的感染性、抗原性等生物活性的物质。 甘油： 在50%的甘油盐水，病毒可存活达几十天、几个月至几年（牛瘟病毒例外）。 二甲基亚砜(DMSO)：减少冷冻过程中微小冰晶的形成 二、保护剂 病毒冻干用保护剂 不同保护剂的作用机制不同: 低分子物质（5%-10%的糖类、5%谷氨酸钠）：使干燥样品中的最终水分含量不致过低，可防止蛋白质的变性。 高分子物质（血清、明胶、白蛋白）：促进病毒制品在冻干过程中的升华干燥，当冻干的病毒加水复原时，可提高溶解性。 明胶、血清、胨、白蛋白、谷氨酸、脱脂奶、乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇等 2.4.3 病毒的保存 一、病毒的短期保存 直接置-30℃冰箱中保存 悬浮于50%甘油盐水中，再置-30℃冰箱中保存 1、快速低温冻存 于病毒悬液内加入灭活的动物血清或其他蛋白质保护剂和5%-10%的DMSO，迅速置-70℃或-196℃保存。 含病毒的组织材料可以直接低温冰冻保存；或先浸入50%甘油生理盐水中，再低温保存。 二、病毒的长期保存 加入保护剂，在真空条件下使冰冻的病毒悬液脱水。 2、冷冻干燥 操作步骤： 1、用保护剂（脱脂牛奶、明胶、饱和蔗糖溶液等）将病毒液作1-5倍的稀释。 2、分装安瓿或青霉素瓶，每支0.5-2mL。 3、放入事先预冷的-30℃—-40℃酒精中冻结1-2h，或于-70℃冰箱中冻结4h以上。 4、置于冻干机内，冷冻干燥。 5、抽真空并封瓶，置-20℃以下低温保存。 1、根据宿主范围的不同，将病毒分为哪几类？ 2、病毒的壳体结构有哪几种类型？ 3、病毒囊膜的特点。 4、长期保存病毒主要采用哪几种方法？ 5、结构蛋白和非结构蛋白的划分依据是什么？其功能如何？ 6、病毒核酸的基本特征？ 7、各种理化因子对病毒的作用。 8、根据你的理解谈一谈在病毒学研究中该如何利用理化因子对病毒的作用？ ？ 思 考 题 唾液酸作为流感病毒的受体能与凝集素(HA)相结合，介导流感病毒侵入机体的细胞 人流感病毒毒株偏嗜α-2，6唾液酸受体,禽流感病毒毒株偏嗜α-2，3唾液酸受体，这与人呼吸道上皮细胞主要表达α-2，6唾液酸受体而禽的上呼吸道上皮细胞主要表达α-2，3唾液酸受体的组织学分布密切相关 Influenza virus 舒跃龙研究小组发现，该新型禽流感病毒能识别α2，3糖苷键连接的唾液酸受体（禽流感病毒受体）和α2, 6糖苷键连接的唾液酸受体（人流感病毒受体）。从而导致该病毒较H5N1禽流感病毒更容易感染人。并且该病毒可以在人的气管和肺组织有效复制，但在肺部组织的复制效率远高于气管组织 这种复制效率的差异可能是目前该病毒不能造成有效人际传播的原因 * * 根据病毒的宿主性质将其分为： 动物病毒(animal virus) 植物病毒(plant virus) 细菌病毒(bacteria virus) 即噬菌体(bacteriophage or phage) 病毒是严格的细胞内寄生物，具有宿主特异性。 病毒能否吸附于宿主细胞 病毒能否进入宿主细胞 病毒能否在细胞内复制 形成的病毒粒子能否由细胞中释放出来 决定病毒的宿主范围的主要因素： 禽流感、猪流感一定能感染人吗？ 人感染禽、猪流感是否一定发病？ 人感染禽、猪流感是否一定能传染给周围的人？ 为什么甲型流感很难防控？ 2.3 病毒体的化学组成 2.3.1 病毒的核酸 2.3.2 病毒的蛋白质 2.3.3 病毒的其它组成 基本组成：核酸、蛋白质 其它组成：脂类、碳水化合物、聚胺类化合物 DNA：Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ RNA：Ａ、 U、Ｇ、Ｃ 2.3.1 病毒的核酸 一、核酸的碱基组成 ※ 同一种病毒碱基组成是恒定的，同科（属）的病毒核酸（Ｇ＋Ｃ）含量相近，不同科属者有所不同，核酸的Ｇ＋Ｃ含量是病毒鉴定的一个指标。 DNA or RNA dsDNA，ssDNA，dsRNA，ssRNA +RNA，-RNA Linear or circular DNA/RNA Monopartite or segmented genome Overlapping genes 二倍体和单倍体基因组 侵染性和非侵染性 二、核酸的类型及结构特征 正链RNA（DNA）：病毒单链RNA(DNA)的核苷酸序列与其mRNA的核