兽用疫苗保护剂和佐剂课件.pptVIP

（1）蜂胶的处理： 蜂胶（4℃以下贮存） 粉碎过筛 按1：4（W/V）加95％乙醇 室温浸泡24～48h 冷却 过滤或离心取上清 透明栗色纯净蜂胶浸液 4℃以下保存备用 除去干渣计算出浸液中含蜂胶量。 （2）蜂胶佐剂疫苗的制备： 灭活菌液或病毒液，加入蜂胶乙醇浸液，使每毫升菌液中含蜂胶10mg，边加边摇荡，成为乳浊状，即可。 蜂胶佐剂疫苗制备方法： 细胞因子类免疫佐剂 （cytokine） 细胞因子的概念 是机体的各种细胞在其生命周期中所释放的具有不同生物学效应的物质，是免疫细胞间相互作用的调节信号。该类物质相互诱生，相互影响，构成一个巨大的细胞因子网络（cytokine network）系统，各种细胞借助自己所释放的细胞因子完成各自的功能，在免疫应答中发挥作用。 细胞因子类免疫佐剂 （cytokine） 细胞因子的分类（根据生物活性） 1. 经典的细胞因子：淋巴毒素（LT）、肿瘤坏死因子（TNF） 干扰素（INF） 2. 对体液免疫和细胞免疫具有调节作用的因子： 白细胞介素（IL）和集落刺激因子（CSF） 1．多效性： ①免疫调节作用的多样性 ②作用方式的非特异性：不表现抗原特异性 2．靶细胞的多样性：构成机体细胞—细胞调节网络 3．多源性： 4．高效性：有免疫激素（immune hormone）之称 5．快速反应性：即对激发因素的迅速反应 细胞因子的作用特点 多样性 Pleiotropism 交叉性 Redundancy 协同性 Synergy 对抗性 Antagonism 1．作为免疫佐剂，提高疫苗的免疫效果 2．作为免疫治疗剂，预防和治疗某些病原感染 3．通过基因重组，构建新型基因工程疫苗 IL-2-AIV-HA重组痘病毒 细胞因子的应用 几种重要的细胞因子 白细胞介素-2（IL-2） 白细胞介素-4（IL-4） 白细胞介素-12（IL-12） γ -干扰素（IFN-γ） 刺激物为抗原或促有丝分裂原（ConA）； T细胞分泌； 无抗原特异性 糖蛋白，含133aa ，分子量15-35kDa； 70℃30min及pH值2-9范围内稳定 IL-2 兽用疫苗冻干保护剂 和佐剂 冻干保护剂（稳定剂） 保护剂：又称稳定剂（stabilizer） ，是指一类能防止生物活性物质在冷冻真空干燥时受到破坏的物质。（指对疫苗生产、血清制备等） 保护剂用途（不同用途加不同保护剂, 主要针对活的微生物或细胞） ① 菌种或毒种保存：常用甘油作保护剂 ② 细胞株保存：常用二甲基亚砜(DMSO) DMSO:二甲基亚砜，一种细胞的保护剂 ③ 疫苗冷冻真空干燥制备时：加脱脂乳（或二甲基亚 砜）和蔗糖等（不同国家有不同配方） ④ 干扰素类生物活性物质的保存：加葡聚糖 保护剂（protector）的分类 分类： （根据其作用机理） ——渗透剂：如二甲基亚砜（DMSO）、甘油和蔗糖等 ——非渗透剂：如聚乙烯吡咯啶酮(PVP)和蛋白质等 （根据其分子量大小） ——高分子物质、低分子物质。 （按其化学性质） ——复合物、糖类、盐类、醇类、酸类和聚合物 ?复合物 脱脂乳、明胶、蛋白质、蛋白胨、糊精、血清、甲基纤维素等 糖类 蔗糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖等 盐类 乳酸钙、谷氨酸钠、氯化钠、氯化钾、醋酸铵、硫代硫酸钠等 醇类 山梨醇、甘油、甘露醇、肌醇、木糖醇等 酸类 柠檬酸、酒石酸、氨基酸等 聚合物 葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等 一些常用的冷冻干燥保护剂 分 类 保 护 剂 疫苗冻干保护剂组成 1. 营养液： 可修复因冻干而受损的细胞，使冻干制品含有一定量水分； 可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状， 增加溶解度 2. 赋形剂： 防止低分子物质的碳化和氧化，保护活性物质不受加热影响 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，增加溶解度 3. 抗氧化剂： 抑制冻干制品中的酶作用，增加生