土源性线虫病诊治课件.ppt

第三部分 肠道寄生虫病病原学检查方法; 生理盐水直接涂片法适用于检查原虫的滋养体和多种蠕虫卵。碘液直接涂片法适用于检查原虫的包囊。本法虽简便、快速，但由于取材少，如果粪便中含虫卵或原虫数量少时，往往会漏检，因此1份粪便以做3张涂片法为宜。操作步骤如下：;(一) 配制试剂 1. 生理盐水配制：称取氯化钠8.5g，溶于1000ml蒸　馏水中即可。或称取氯化钠0.9克，溶于100毫升蒸馏水中，即可使用。 2. 碘液配制： 分别称取4g碘化钾和碘2g，并量取蒸馏水100ml，先将碘化钾溶于水中，然后再加碘，溶解后贮于　棕色瓶中备用。 ;(二) 材料 载玻片； 盖玻片20毫米×20毫米； 木制小签或白金耳（0.46毫米， 镍、铬的合金金属）； 玻璃铅笔； 氯化钠溶液； 卢戈氏碘溶液， 稀释5倍。;(三) 操作步骤： 取一玻片： — 滴一滴氯化钠溶液于玻片左侧中央； — 滴一滴碘溶液于玻片右侧中央。;4. 用木制小签或白金耳，从标本采取第二份粪便与一滴碘溶液混合。;6. 用玻璃铅笔在玻片上划出标本的编号。;7. 在显微镜下检查标本，检查盐水标本要使用10倍和40倍的物镜及5倍或6倍目镜。检查碘溶液标本使用40倍的物镜。由于卵和包囊是无色的，故要降低光量，使用聚光镜光阑，或降低聚光镜以加强对比度。;8. 用10倍的物镜检查第一个标本。如图所示，从左手上角开始检查。; 为了保证不至于漏掉某一视野范围，可在视野的边缘上选择一目的物，并移动玻片使其通过整个显微镜检测视野，直到该目的物到达视野的另一边缘为止。在全部检测面积上，要重复这种操作程序。; 加藤厚涂片法是50年代日本加藤氏首先提出，是用在甘油透明液中浸泡过的亲水玻璃纸替代盖玻片。该法一次检查粪便量是直接涂片法的20倍以上。由于检出率比直接涂片法高，而且简便、省时、费用又少，故特别适用于集团检查。本法可以检查粪便中各种寄生虫卵。; 1972年Katz等设计出圆孔的卡片纸作定量，使该法既可作定性检查又可作定量检查。故自此以后该法称为Kato-Katz厚涂片法，国外现多用塑料板作定量板，规格为30mm×40mm×1.37mm，中央孔圆直径为6mm，圆孔的容积为38.74mm3。; 我国用于全国人体重要寄生虫病现状调查的塑料定量板，中央孔为圆台形，规格为30mm×40mm×1mm，中央圆台形孔上端直径为3mm，孔下端直径为4mm，容积为38.75mm3，可容粪便41.67mg。计算每克粪便虫卵数（EPG），只要将每片读得的虫卵数乘以24即可。;(一) 改良加藤厚涂片法（Kato-Katz法） 1. 材料 透明液（蒸馏水100ml＋纯甘油100ml＋3%孔雀绿1ml); 亲水性透明玻璃纸需在透明液中浸泡24小时 以上； 尼龙绢片（80目或100目）或金属丝网（60或80目）片，大小约为5×5cm； 圆台形孔塑料定量板； 塑料刮片。;2. 操作步骤： (1) 尼龙绢（5cm×5cm）放在粪便上，用刮片刮取粪便；;(3) 小心取下定量板，则粪样就留在载玻片上；取一张透明液浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液后盖在粪便上。;(5) 待粪便透明后及时镜检;4. 注意事项 Kato-Katz厚涂片在室温25℃，75%湿度下，涂片放置不宜超过2小时，若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。在南方温度高的地区或西北气候干燥地区涂片放置时间要缩短，常放置1小时或半小时即可镜检，甚至涂片制好后马上就可检查。总之只要涂片透明了就要及时镜检。否则薄壳虫卵因透明过度而看不清，造成漏检或误检。;(二) 加藤厚涂片法（Kato厚涂片法） 加藤厚涂片法操作步骤更简单，不用定量板也不用尼龙绢过滤粪便，比改良加藤厚涂片法减少了(1)、(2)二个步骤。;本法主要用于检查钩虫卵、毛圆线虫属线虫卵。 (一) 材料： 1. 浮聚瓶 高约3.5cm，直径约2cm的平底直筒玻璃瓶，也可 用青霉素瓶代替。 2. 饱和盐水 饱和盐水的配制：将食盐徐徐加入盛有沸水的烧　 瓶中, 不时搅拌至食盐不再溶解为止。一般100ml沸水　 需加40g左右食盐，冷后取上清液使用。;(二) 操作步骤： 1. 自粪便不同处挑取如蚕豆大小的粪块，置于盛有少量饱和盐水的漂浮管中;3. 将满时，改用滴管，加至略高于管口但不溢出为止。;5. 如图垂直向上提起载玻片; 本方法主要用于检查线虫幼虫和鉴别美洲钩虫和十二指肠钩虫的幼虫。 (一) 材料 锥形离心管（长11.5cm、管口内径1.5cm）或类似试管形状的塑料袋。试管架、吸管、载玻片、盖玻片(20mm×20mm)