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l bFGF论文:bFGF结合肽对bFGF刺激的K562细胞增殖的影响及其作用机制 【中文摘要】探讨前期从噬菌体展示随机七肽库中获得的新型bFGF特异性结合肽(P7)对bFGF诱导的K562细胞增殖的影响及其机制。方法:倒置显微镜下观察结合MTT法检测P7对细胞的毒性作用,MTT法检测不同浓度的P7单独作用对K562细胞增殖的影响,并进一步检测P7对bFGF刺激的K562细胞增殖的作用;流式细胞术分析P7对bFGF作用的K562细胞周期的影响;western blot检测P7对bFGF刺激的K562细胞中细胞外调节蛋白激酶ERK1/2和其上游蛋白促增殖信号分子MEK活化水平的影响;原子力显微镜检测P7对bFGF刺激的K562细胞表面超微结构的影响;应用蛋白质组学的双向电泳和质谱联用技术,获得P7处理前后bFGF诱导的K562细胞中差异表达蛋白情况,并通过western blot加以验证。结果:检测的浓度范围内P7对K562细胞形态和增殖无显著影响,但可呈剂量依赖性抑制bFGF诱导的K562细胞增殖;P7可减少bFGF刺激下处于S期的细胞比率,使细胞阻滞在G0/G1期;P7可降低bFGF激活的K562细胞中信号分子ERK1/2和MEK的磷酸化水平;bFGF刺激K562细胞增殖时,细胞... 【英文摘要】Aim:To explore the effect of a novel bFGF-binding peptide previously obtained by screening from the phage display random heptapeptide library on the proliferation of human chronic myeloid leukemia cells (K652) induced by basic fibroblast growth factor.Methods:An inverted microscope was applied to observe the cytotoxic effect of P7 on K652 cells. The influences of P7 at different concentrations on the proliferation of K562 cells stimulated with or without bFGF were detected by MTT assay, and the effect o... 【关键词】bFGF 结合肽 细胞增殖 信号通路 蛋白质组学 【英文关键词】bFGF binding peptide cell proliferation cell signal pathway proteomics 【索购全文】联系Q1:138113721 Q2:139938848 【目录】bFGF结合肽对bFGF刺激的K562细胞增殖的影响及其作用机制 摘要 4-5 Abstract 5-6 目录 7-8 1 前言 8-18 1.1 白血病 9-11 1.2 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 11-13 1.3 MAPK信号通路 13-14 1.4 原子力显微镜(AFM) 14-16 1.5 蛋白质组学 16-18 2 技术路线图 18-19 3 材料与方法 19-29 3.1 主要试剂 19-20 3.2 主要仪器 20-21 3.3 主要试剂配制 21-22 3.4 实验方法 22-29 4 实验结果 29-41 4.1 P7对K562细胞形态的影响 29 4.2 P7对bFGF诱导的K562细胞增殖的影响 29-30 4.3 P7对bFGF诱导的K562细胞周期的影响 30-31 4.4 P7对bFGF诱导的K562细胞内信号分子磷酸化水平的影响 31-33 4.5 P7对bFGF诱导的K562细胞表面超微结构的影响 33-35 4.6 P7对bFGF诱导的K562细胞蛋白组学影响 35-39 4.7 western blot方法验证差异表达蛋白PA2G4 39-41 5 讨论与结论 41-46 5.1 讨论 41-44 5.2 小结 44-45 5.3 进一步完善之处 45-46 参考文献 46-54 附录 54-65 英文缩略词表 65-66 攻读硕士期间发表论文情况 66-67 致谢 67
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