β-榄香烯对膀胱癌T24细胞侵袭与迁移的影响-外科泌尿外科专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 BSA Bovine serum Albumin 牛血清白蛋白 PVDF polyvinylidene difluoride 聚偏二氟乙烯 DMEM Dolbecco’s Modified Eagle Medium 优质培养基 FBS Fetal Bovine serum 胎牛血清 LN Laminin 层粘连蛋白 β-榄香烯对膀胱癌 T24 细胞侵袭与迁移的影响 中文摘要 目的：研究 β-榄香烯对膀胱癌 T24 细胞侵袭与迁移的影响，对 β- 榄香烯抗肿瘤可能作用机制进行研究。 方法：体外培养膀胱癌 T24 细胞，用不同浓度梯度的 β-榄香烯分别 作用于膀胱癌 T24 细胞 24 小时，采用 MTT 比色法检测其对增殖的影响； 应用 Transwell 小室进行人工重组基底膜（Matrigel 胶）侵袭实验，观察 β-榄香烯对膀胱癌 T24 细胞侵袭的影响；应用划痕实验观察 β-榄香烯对 膀胱癌 T24 细胞体外趋化运动性；应用 Western blot 方法检测各组细胞 中 MMP-9 蛋白表达水平变化。 结果： MTT 比 色 法 显 示 ： 不同浓度梯度分别为 0.01mg/ml 、 mg/ml、0.03mg/ml 的 β-榄香烯作用膀胱癌 T24 细胞 24h 后，其吸光 度值比对照组低，而且随药物浓度的增高逐渐降低，对膀胱癌细胞增殖 抑制作用逐渐增强，呈现剂量-效应依赖关系；Transwell 实验结果显示， 0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml 的 β-榄香烯分别作用膀胱癌 T24 细胞 24 小时，每组随机抽取 10 个高倍视野（×400）进行穿过基质胶的细胞 计数，处理组透膜细胞数分别为 27±1.87、20.2±0.83、14±2 个，较对照 组 39.2±3.1 个明显减少，亦呈剂量-效应依赖关系；划痕实验结果显示， 终浓度分别为 0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml 的 β-榄香烯作用膀胱 癌 T24 细胞，取作用 0 小时和 24 小时观察划痕愈合情况。对照组划痕 愈合显著快于各处理组，证明处理组细胞的迁移能力被抑制；应用 Western blot 方法检测发现，不同浓度的 β-榄香烯处理膀胱癌 T24 细胞 24 小时 MMP-9 蛋白表达水平下调，并呈剂量依赖关系。 结论：1.β-榄香烯可抑制膀胱癌 T24 细胞增殖、侵袭与迁移能力。 2.β-榄香烯抗肿瘤细胞增殖、侵袭与迁移的机制可能与其下 调 MMP-9 蛋白的表达水平有关。 关键词：膀胱癌 T24 细胞；β-榄香烯；增殖；侵袭；迁移；MMP-9 Effects of β-elemene on Invasion and Metastasis of Bladder Cancer T24 Cell lines Objective: To explore the effects of β-elemene on invasion and metastasis of the Bladder Cancer T24 Cell lines and to investigate the possible mechanism． Methods:Bladder Cance T24 cell lines were cultured in vitro and were treated with 0.01、0.02、0.03mg/L β-elemene for 24 h respectively．The samples were detected by the MTT-method so as to show the effect of β-elemene on proliferation of bladder cancer T24 cell lines．The effects of β-elemene on cell migration and invasion were detected by Wound Healing assay and Transwell assay．The expression of MMP-9 were detected by Western blot． Results：Bladder Cance T24 cell lines were exposed to the β-elemene with 0.01、0.02、0.03mg/L for 24h respectively had less absorbance value than control．The proliferation of Bladder Cance T24 cells we