αSMA在代谢综合征大鼠模型肾脏的表达及其干预研究-心血管内科学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 PAGE PAGE 1 α-SMA 在代谢综合征大鼠模型肾脏的表达及其干预研究 中文摘要 研究目的： 1．构建代谢综合征大鼠模型。 2．探讨代谢综合征大鼠模型早期肾脏α-SMA 的表达。 3．RAAS 拮抗药物及降脂药物分别干预代谢综合征大鼠模型后早期肾脏α-SMA 的表达变化。 研 究方法： 1. 动物模型的构建 选择 3 周龄 SPF 级雄性 Wistar 大鼠 36 只，随机分为正常饲料（含 0.5%NaCl） 喂养组（normal sodium, NS，n=12）、高盐高脂饲料（4%NaCl+49%Fat）喂养组 （high sodium and fat, HSF，n=24）。饲养 12 周时，每组随机取 6 只处死（为 NS-1 组和 HSF-1 组），称体重，测量颈总动脉有创血压、血脂、血糖及血胰岛素 浓度；根据稳态胰岛素抵抗指数（HOMA-IR index：fasting insulin X fasting glucose/22.5 [1] ）评价是否存在胰岛素抵抗，根据代谢综合征的诊断标准及统计 学方法进行组间比较评价模型是否构建成功。 2.药物干预 NS 组（n=6）继续以正常饲料喂养，为 NS-2 组。HSF 组随机分为 3 组：一组 继续单以高盐高脂饲料喂养（HSF-2 组，n=6），其余动物在喂养高盐高脂饲料同 时分别加入 RAAS 拮抗药替米沙坦（HSF+T，n=6，10mg/kg/d）及降脂药物辛伐他 汀（HSF+S，n=6，10mg/kg/d）干预。至 30 周时结束实验，观察药物干预情况下 体重、颈总动脉有创血压、血脂、血糖、血胰岛素浓度、计算稳态胰岛素抵抗指 数。 3.代谢综合征大鼠肾组织形态学观察及免疫组化a-SMA表达 建立以高盐高脂诱导的代谢综合征动物模型，饲养 12 周处死的大鼠及继续 饲养 18 周到 30 周后的大鼠分离出肾脏组织，HE 染色、Masson 染色 (20×10 倍) 使用 Leica DM4000 显微镜自带的显微成像系统在相同的条件下采集数码图片。 免疫组化切片在 Leica DM4000 显微镜下按统一条件采集，每个组取 3 个连续切 片，每个切片在 10×20 倍视野下随机取 5 个非重叠视野，避开切片边缘和组织 破损区，拍照，用 Image Pro Plus 6.0 软件分析每张照片中阳性染色面积，选 择常用的参数阳性面积(Area)的百分比代表 a-SMA 表达量。5 个比值的平均值作 为每个切片肾组织区域 α-SMA 的阳性率（％）。 研 究结果： 1. 体重变化 1.1 高盐高脂致体重明显增加：实验 12 周，HSF-1 组比 NS-1 组体重明显增加 （326.45±6.84g 比 303.3±9.13g ，P＜0.01）；但实验 30 周时，NS-2 组 （434.73±10.19g），HSF-2 组（458.83±12.85g），两组比较，P＞0.05。结果 提示高盐高脂饮食可在短期内增加体重。 1.2 RAAS 拮抗药物对体重改变不明显：使用替米沙坦干预 18 周后测量体重， HSF+T 组与 NS-2 及 HSF-2 组差异无统计学意义（P＞0.05），结果提示：使用 RAAS 拮抗药物对体重无影响。 1.3 辛伐他汀对体重改变不明显：使用辛伐他汀治疗 18 周后，HSF+S 体重与 NS-2 及 HSF-2 组无差异（P＞0.05）。结果提示：使用辛伐他汀干预对体重无影响。 2. 颈总动脉有创血压 2.1 高盐高脂导致收缩压升高：实验 12 周，HSF-1 组（189.43 ??14.65mmHg）明 显高于 NS-1 组（153.65 ??20.53mmHg ，P＜0.01），同样，实验 30 周时 HSF-2 组 （190.03 ??14.48mmHg）收缩压明显高于 NS-2 组（161.00 ??19.49mmHg，P＜0.05）。 结果提示长期高盐高脂饲料喂养正常 Wistar 大鼠可诱导形成高血压模型。 2.2 替米沙坦有效降低收缩压：给予替米沙坦干预 18 周后检测收缩压发现， HSF+T 组收缩压（161.95 ??15.62mmHg）较 HSF-2 组低（P＜0.05）；HSF+T 组与 NS-2 组间无差异（P＞0.05）。结果提示 RAAS 拮抗药能有效地降低由高盐高脂 诱导的高血压。 2.3 辛伐他汀对血压影响不明显：给予辛伐他汀干预 18 周后检测收缩压发现， HSF+S 组收缩压（180.36 ??9.94mmHg）与 HSF-2 组比较无明显变化（P＞0.05）， 均高于 NS-2 组（P＜0.05