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SEA101Hu 96T
基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒
(酶联免疫吸附试验法)
适用生物:人
使用说明书
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
第12版 (2016年05月修订)
[预期应用]
本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物
液体中MMP3含量。
[试剂盒内容]
试剂名称 数量 试剂名称 数量
96孔板 (预包被) 1 96孔板覆膜 4
标准品 2 标准品稀释液 1×20mL
检测溶液A 1×120μL 检测溶液A稀释液 1×12mL
检测溶液B 1×120μL 检测溶液B稀释液 1×12mL
TMB底物 1×9mL 终止液 1×6mL
洗涤液 (30×) 1×20mL 使用说明书 1
[需自备的设备及试剂]
1、450±10nm滤光片的酶标仪 (建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量移液器及吸头
3、稀释样品的EP管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
7、0.01mol/L (或1×)磷酸缓冲盐 (PBS),pH 7.0-7.2
[试剂盒的储存及有效期]
1、 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶
液A、检测溶液B 以及96孔板保存于-20C,其余试剂请置于4C保存备用。o o
2、 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝
箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20C保存。o
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产
品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
[标本的采集与保存]
1、 血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上o
清即可,将上清置于-20C或-80C保存,避免反复冻融。o o
2、 血浆:用肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8C 1,000×g离心15分钟,取上清o
即可检测,或将上清置于-20C或-80C保存,避免反复冻融。o o
3、 组织匀浆:不同类型的组织制备匀浆的方法会有所不同
1) 取适量组织块,在预冷PBS (0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,匀浆前先称重。
2)将组织切成小块,均匀的放入放置在冰上的装有新鲜裂解缓冲液(货号IS007,应依据目标蛋白的亚细胞定
位选择不同类型的缓冲液)的玻璃均质器中 (微小的组织也要如此)。 (质量体积比 1:20-1:50,例如:
1mL裂解缓冲液中加入20-50mg组织样本。)
3) 将得到的悬浊液经过超声处理至澄清。
4) 将制备好的匀浆液10,000×g离心5分钟,弃沉淀,上清即可用于检测或置于-20C下保存。o
4、细胞裂解液:在分析试验之前,细胞需利用以下
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