发酵设备跟消毒灭菌.pptVIP

第三节 发酵设备及消毒灭菌 发酵设备——发酵罐 发酵罐的特点 轴封严密，泄漏少 能承受一定压力、温度 搅拌通风装置保证气液充分混合 具有足够的冷却面积 死角少，灭菌彻底 适宜的径高比（高与直径的比值为2.5—4） 发酵罐的类型 搅拌釜反应器 鼓泡式反应器 气升式反应器 发酵辅助设备 无菌空气系统 无菌空气的要求 灭菌系统、管道、阀门 培养基及其灭菌 培养基（medium） 培养基的成分 碳源、氮源、无机盐、前体物、促进剂、抑制剂 培养基的类型 按组成 按状态 按用途 培养基灭菌 空罐灭菌 实罐灭菌 连续灭菌：高温短时 第四节 发酵工程制药的过程与控制 种子的扩大培养 微生物发酵方式 分批发酵 补料分批发酵 半连续发酵 连续发酵 发酵过程中的中间分析项目 产物产量 pH 糖 氨基氮 菌丝形态 发酵过程的影响因素及控制 菌体浓度 营养物质 温度 pH 溶氧 泡沫 染菌 发酵终点的判断 菌体浓度 在适合的生长速率下，发酵产物的产率与菌体浓度成正比关系。特别是初级代谢产物。 菌体浓度过低，产物产率下降。 菌体浓度过高，产生其他影响。 措施：调节培养基中的营养物质的浓度。 营养物质 碳源 氮源 磷酸盐：生长亚适量浓度 补料：半饥饿状态 温度 考虑菌种及生长阶段 综合考虑其他培养条件 考虑菌种生长情况 发酵热 pH 补加酸或碱和补料的方式 溶氧和CO2 溶氧异常下降 溶氧异常上升 措施 泡沫 负面影响 措施 染菌 发酵前期染菌 发酵后期染菌 发酵终点的判断 提高产物的产量和经济效益 降低生产成本 主要指标与中间分析项目雷同 第五节 发酵工业中的 代谢调控 代谢调控 运用人为的方法对微生物的代谢调节系统进行遗传改造和条件的控制，在保证微生物适当生长的条件下，建立新的代谢方式，以期按照人们的意志有目的地过量积累所需的代谢产物，提高生产效率。 初级代谢 能使营养物质转变成机体的结构物质和对机体具有生理活性作用的物质，或是为机体生长提供能量的一类代谢。 次级代谢 存在于某些生物中（如某些植物和微生物），并在一定的生长期内出现的一类代谢。在抵御恶劣环境、伪装躲避、清除自身毒素和排泄物时很重要。 微生物初级代谢与次级代谢的关系 代谢产物合成的调控 初级代谢对次级代谢的调节 碳代谢物的调节 氮代谢物的调节 磷酸盐的调节 ATP的调节 诱导物调节 末端产物的反馈调节 细胞膜通透性调节 其他：金属离子、溶解氧等的调节 初级代谢对次级代谢的调节 次级代谢产物以初级代谢产物为母体衍生而来。 次级代谢产物合成反应的酶由初级代谢途径的酶演化而来。 因此，初级代谢终产物的过量往往会抑制次级代谢产物的合成。 碳代谢物的调节 葡萄糖效应 解除方法 变更速效碳源和迟效碳源的配比； 流加葡萄糖。 氮代谢物的调节 分解代谢物阻遏效应 解除方法 变更速效氮源和迟效氮源的配比； 流加无机氮。 磷酸盐的调节 磷酸盐效应：类似于葡萄糖效应 机制： 促进初级代谢、抑制次级代谢 抑制次级代谢产物前体的形成 阻遏某些关键酶的合成 抑制某些关键酶的活性 增加菌体能荷状态 ATP的调节 直接影响次级代谢产物合成和糖代谢中某些酶的活性。 如四环素的合成。 诱导物调节 某些参与次级代谢产物合成的酶为诱导酶。 需有诱导物存在，诱导酶才能形成。 如甲硫氨酸诱导头孢菌素C。 末端产物的反馈调节 末端产物抑制合成途径中的第一个酶的活性，从而降低产物合成代谢的能力。 原位产物分离偶联技术（in situ product removal，ISPR） 细胞膜通透性调节 利于代谢产物分泌到胞外，减少胞内浓度，从而避免末端产物的反馈调节。 如：谷氨酸的生产，采取控制生物素浓度、添加青霉素、添加吐温80等表面活性剂、选育油酸缺陷型菌株等方法。 抗生素的发酵生产 抗生素的定义 生物在其生产活动过程中所产生，并能在低微浓度下有选择性地抑制或杀灭其他微生物或肿瘤细胞的有机物。 发展历史 1929年，英国弗莱明发现青霉素。二战期间，大规模发酵生产，世界上最早用于临床的抗生素 。 20世纪60-70年代，利用生物合成和半合成方法研制抗生素衍生物。 20世纪80年代至今，根据作用机理理性筛选阶段，包括耐药筛选模型等。 抗生素的分类 根据抗生素的生物来源分 根据抗生素的作用对象分 根据抗生素的作用机制分 根据抗生素的化学结构分 根据抗生素的生物来源分 放线菌产生的抗生素：链霉素、四环素、红霉素 真菌产生的抗生素：青霉素、头孢菌素 细菌菌产生的抗生素：多粘菌素、杆菌肽 根据抗生素的作用对象分 抗G+的抗生素：青霉素、红霉素 抗G-的抗生素：链霉素、多粘菌素 广谱抗生素：氨苄青霉素 抗真菌抗生素：两性霉素 抗病毒和噬菌体抗生素：氯霉素、艾霉素 抗原虫抗生素：灭滴虫素 抗癌抗生素：阿霉素、博莱霉素 根据抗生素的