GB/T 7918.3-1987化妆品微生物标准检验方法　粪大肠菌群.pdf

中华 人 民共 和 国 国家标 准 UDC 668.58:576 化妆品微生物标准检验方法 .85.07 粪 大 肠 菌 群 GB 7918.3一 87 Standardmethodsofmicrobiological examinationforcosmetics Fecalcoliforms 粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便 检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染，有可 能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险 因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。 1 方法提要 根据粪大肠菌群所具有的生物特性，如革兰氏阴性无芽胞杆菌在44℃培养24^-48h能发酵乳搪产 酸并产气，能在选择性培养基上产生典型菌落，能分解色氮酸产生艘基质。 2 培养基和试荆 2.1 乳搪胆盐培养基 成分:蛋白陈 20g 猪胆盐 5g 乳糖 5g 0.4%澳甲阶紫水溶液 2.5ml 熬馏水 l000ml 制法:将蛋白陈、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中，调pH到7.4，加入指示剂，混匀，分装试管(每支试管中 加一个小倒管)。115C(10Ib)20min灭菌。 2.2 双倍浓度乳精胆盐培养基 按上述乳糖胆盐培养基成分，蒸馏水量不变，其他成分量加倍。 2.3 伊红美蓝((EMB)琼脂 成分:蛋白陈 108 乳搪 10g 碑酸氢二钾 2g 琼脂 20g 2%伊红水溶液 20m1 0.5写美蓝水溶液 13ml 蒸馏水 1000ml 制法:先将琼脂加到900ml燕馏水中，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾蛋白陈，混匀，使之溶解。再 以蒸馏水补足至1000m1。校正pH值为7.2-7.4.分装于烧瓶内，121C(151b)15min高压灭菌备用。 临用时加入乳糖并加热融化琼脂。冷至60℃左右以无菌手续加入灭菌的伊红美蓝溶液，摇匀。倾注平 皿备用。 中华人民共和国卫生部 1987一05一28批准 1987一10一01实施 GB 7918。3一 87 2.4 蛋白陈水(作靛基质试验用) 成分:蛋白陈(或胰蛋白陈) 20g 氯化钠 5g 蒸馏水 l000m1 制法:将上述成分加热熔化，调pH值为7.0--7.2，分装小试管，高压灭菌121C(15lb)15min, 2.5 靛基质试剂 柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75ml戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25m1, 试验方法:接种细菌于蛋白陈水中，于44℃培养24h,沿管壁加柯凡克试剂0.3-0.5ml.轻摇试 管。阳性者于试剂层显深玫瑰红色。 注 蛋白陈应含有丰富的色氨酸，每批蛋白陈买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用。 2.6 革兰氏染色法 2.6.1 染液制备 2.6.1.1 结晶紫染色液: 结晶紫 lg 95%酒精 20ml 1纬草酸按水溶液