丹参素钠的有关质检查的实验研究.pptVIP

丹参素钠的有关物质检查的实验研究 甲组 组员：张迪 孔周杨 刘清 胡建军 王鹏 丁璇 * * 指导教员：赵卫权 一.实验目的 通过HPLC研究丹参素钠中可能混有的杂质，研究丹参素钠的固有性质，贮藏条件，考察影响原料药和制剂质量的贮藏条件，为贮藏、处方和加工工艺提供资料。 二.实验仪器与试剂 本实验采用HPLC法测定 色谱柱：DiamonsilTM C18 规格：5μm,4.6×200mm 流动相：甲醇-水（含1%乙酸）缓冲溶液（5:95） 流速：1.0ml/min 检测波长：280nm 供试品：丹参素钠原料溶于流动相的溶剂 三.实验思路 3.1 利用HPLC测验检测丹参素钠中可能混有的结构类似物质。 3.2 考察影响丹参素钠原料药和制剂成分的影响因素，为贮藏提供信息。 3.3 在杂质可以分离提取的情况下，分离出杂质并且对其进行分析，确定杂质成分。（还未完成） 四.实验过程 4.2 供试品的配制 精密量取本品丹参素钠14.14mg，取流动相5ml溶解本品，稀释10倍作为供试品。 4.1 流动相的配制 取去离子水洗净的500ml棕色试剂瓶，精密量取甲醇20ml，再用500ml量筒取蒸馏水380ml，用10ml量筒取乙酸4ml，混合摇匀后，放入超声仪，除气泡10min。 4.3 供试品处理 用塑料样品管取少量供试品，分别进行光照、灯照、30℃加热、50℃加热、70℃加热、90℃加热等处理。 4.4 HPLC试验 利用所选的色谱柱和流动相对未处理的供试品以及处理后的供试品进行洗脱，记录色谱图。 4.5 色谱图分析处理 分组比较色谱图的主峰以及杂质峰，得出结论。 五.实验结论 5.1 供试品HPLC测试得出图谱 T=13.773时，出现最大峰 T=18.248时，出现含量最高的杂质峰 5.2 比较30℃、50 ℃ 、70 ℃和90 ℃加热40min后HPLC测试后得到的色谱图。 30℃加热40min 50℃加热40min 70℃加热40min 90℃加热40min 分析： 164736.953 21.665 2372821.250 15.765 90℃ 133112.000 21.532 2154601.500 15.648 70℃ 128375.797 21.807 2284040.000 15.882 50℃ 126810.102 21.965 2237589.100 15.973 30℃ 峰面积 T2 峰面积 T1 名称 结论：随着温度升高，主杂质A含量升高。丹参素钠本品应该在低温处保存。 5.3 比较90℃加热3.5小时、4.5小时和5小时的色谱图，以及冷却2天后继续加热的色谱图。 90℃加热3.5小时 90℃加热4.5小时 90℃加热5小时 120617.898 23.007 102740.703 19.240 2291581.750 14.315 5小时 89245.719 21.927 146609.125 19.190 3154075.500 14.323 4.5小时 13120.000 21.507 123294.297 18.273 2619930.250 13.640 3.5小时 峰面积 T3 峰面积 T2 峰面积 T1 名称 分析 90℃加热5小时冷却后 90℃继续加热1小时 90℃加热2小时 结论：高温加热时间长出现新的杂质B（T3峰），且随着加热时间的增加杂质的含量增加，冷却后此杂质减少甚至消失，再次加热后又会产生，可能为丹参素钠热分解产生。 519512.688 17.398 8673404.000 13.032 继续加热2小时 501651.844 17.132 9280839.000 12.898 继续加热1小时 176151.297 17.665 9812465.000 13.232 90℃加热后冷却 峰面积 T2 峰面积 T1 名称 分析 5.4 比较供试品光照和灯照后的色谱图 日照7小时 灯照24小时 灯照45小时 分析 21620.199 18.248 2053741.750 13.773 灯照45小时 15239.200 18.307 2234676.250 13.798 灯照24小时 6531.000 18.198 2267644.000 13.765 日照7小时 峰面积 T2 峰面积 T1 名称 结论：供试品中杂质A含量随光照时间增加而增加。 5.5 实验结论 丹参素钠原料药在高温时会出现新的杂质，杂质B含量随温度升高而升高，充分冷却后新出现的杂质B会消失。原料药中的主杂质A