2018学年高中生物专题2微生物的培养与应用第5课时微生物的实验室培养二同步备课ppt课件新人教版.pptVIP

;;一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基;;;2.制备步骤 (1)培养基的配制 计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基 的比例，计算配制100 mL培养基时 各成分的用量 ↓ 称量 ↓;溶化 │ ↓ ：1 moL的NaOH、pH试纸，将pH调为7.4 ～7.6 ↓; ：趁热分装到洁净锥形瓶中 ↓ 加棉塞：用棉花不用脱脂棉，脱脂棉吸水 ↓ 包扎：外包 纸，且挂标签;(2)灭菌 (3)倒平板 ①将 的培养皿放在 的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 ②右手拿锥形瓶，使瓶口 。 ③用左手将培养皿打开一条 的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 ④等待平板冷却凝固后，将平板 。;;答案　琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。;答案　通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。;答案　未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。;;;问题导析　(1)培养基灭菌后，需冷却至 左右时才能倒平板，原因是琼脂在44 ℃以下凝固。 (2)倒平板的过程要在 附近进行。;返回上页;答案　要对培养基进行高压蒸汽灭菌，对培养皿进行干热灭菌，酒精灯火焰旁属于灼烧灭菌。;;;取菌种 │ ↓;平板 划线 │ ↓ 培养：将平板 ，放入培养箱中培养;(2)稀释涂布平板法 ①原理：将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。;②步骤 Ⅰ.系列稀释操作 a.编号为101～106试管中分 别盛有 水。 b.用移液管吸取 培养 的菌液，注入101倍稀释的试管中，得到稀释菌液。 c.从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中。依次类推，完成菌液的稀释。 注意　移液管要经过灭菌，并且操作应在酒精灯火焰附近完成。;Ⅱ.涂布平板操作 涂布器消毒：将涂布器浸在盛有 的烧杯中 ↓ 取菌液：取少量菌液滴加到 表面 ↓ 涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精 燃尽后， 8～10 s ↓ 涂布平板：用涂布器将 均匀涂布在培养基表面，涂布时 可转动培养皿，使菌液分布均匀;2.菌种保藏;;答案　操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。;答案　划线后末端含有的细菌数目较少，每次从上一次的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。;答案　应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适，吸管头不要接触任何其他物体，吸管要在酒精灯火焰附近等。;归纳总结　;;解析　稀释涂布平板法要先将菌液进行一系列的梯度稀释，A项正确； 只有在稀释度足够高的菌液中，聚集在一起的微生物才被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，故而要将不同稀释度的菌液分别涂布平板，B项正确、C项错误； 在稀释涂布过程中，为防止杂菌污染，要对培养基和涂布器等进行严格灭菌处理，D项正确。;答案　为保证结果准确，每个稀释度的菌液一般涂布3个平板，并对结果取平均值。;答案　可能是稀释度不够，聚集在一起的微生物没能被分散成单个细胞。;;问题导析　(1)对菌液进行稀释时，菌液中菌体的浓度越高，则稀释的倍数也要 ，菌体的浓度低时，则稀释的倍数不必 。 (2)高温会杀死菌体，所以一些经过高温或灼烧灭菌的器材需要 后才能接触菌种。 (3)平板划线法的多次划线中，菌体 ，即不同划线处的________ 不同，所以形成的菌落并非全部是由单个菌体繁殖而成的。;返回上页;答案　决定稀释倍数及划线次